[發明專利]一種總三碘甲狀腺原氨酸磁微粒化學發光免疫定量檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201810550557.0
• 申請日: 2018-05-31
• 公開（公告）號: CN108776218A
• 公開（公告）日: 2018-11-09
• 發明（設計）人: 李明勇;姜雪蓮;張玲;胡潔;黃偉
• 申請（專利權）人: 湖南遠璟生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/535;G01N33/577
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1.一種總三碘甲狀腺原氨酸磁微粒化學發光免疫定量檢測試劑盒，其特征在于：它包括鏈霉親和素包被的磁微粒懸浮液，堿性磷酸酶標記的三碘甲狀腺原氨酸衍生物，生物素標記的三碘甲狀腺原氨酸抗體，測試稀釋液，總三碘甲狀腺原氨酸校準品，總三碘甲狀腺原氨酸質控品。

2.根據權利要求1所述的一種總三碘甲狀腺原氨酸磁微粒化學發光免疫定量檢測試劑盒，其特征在于：所述鏈霉親和素包被的磁微粒懸浮液為表面包裹帶有鏈霉親和素的四氧化三鐵懸浮于磁微粒包被物緩沖液中所形成的懸浮液，所述鏈霉親和素包被的磁微粒懸浮液的濃度為0.1mg/mL～1.0mg/mL，所述磁微粒包被物緩沖液為20mM～200mM Tris（三羥甲基氨基甲烷）緩沖液，PH范圍為6.5～8.0；

所述堿性磷酸酶標記的三碘甲狀腺原氨酸衍生物為堿性磷酸酶和三碘甲狀腺原氨酸衍生物的偶聯物，其中三碘甲狀腺原氨酸衍生物為N-羥基琥珀酰亞胺(NHS) 和三碘甲狀腺原氨酸的化學合成物質，或N-磺酸化羥基琥珀酰亞胺(Sulfo-NHS)和三碘甲狀腺原氨酸的化學合成物質；

所述生物素標記的三碘甲狀腺原氨酸抗體為生物素和三碘甲狀腺原氨酸抗體的偶聯物，其中三碘甲狀腺原氨酸抗體為小鼠單克隆抗體。

3.根據權利要求1或2所述的一種總三碘甲狀腺原氨酸磁微粒化學發光免疫定量檢測試劑盒，其特征在于：所述鏈霉親和素包被的磁微粒懸浮液為表面包裹帶有鏈霉親和素的粒徑為1um～1.5um的四氧化三鐵顆粒懸浮于磁微粒包被物緩沖液中懸浮液，所述鏈霉親和素包被的磁微粒懸浮液的濃度為0.5mg/mL；所述磁微粒包被物緩沖液為100mM Tris（三羥甲基氨基甲烷）緩沖液，PH為7.0。

4.根據權利要求1或2所述的一種總三碘甲狀腺原氨酸磁微粒化學發光免疫定量檢測試劑盒，其特征在于：所述堿性磷酸酶標記的三碘甲狀腺原氨酸衍生物為稀釋于酶標記物緩沖液中的堿性磷酸酶和三碘甲狀腺原氨酸衍生物的偶聯物，所述堿性磷酸酶和三碘甲狀腺原氨酸衍生物的偶聯物與酶標記物緩沖液的稀釋比例為1:400～1:2000，優選的稀釋比例為1:800；酶標記物緩沖液為20mM～200mM Tris緩沖液，PH范圍為6.5～8.0，優選的濃度為20mM，優選的PH為7.4。

5.根據權利要求1或2所述的一種總三碘甲狀腺原氨酸磁微粒化學發光免疫定量檢測試劑盒，其特征在于：所述生物素標記的三碘甲狀腺原氨酸抗體為稀釋于生物素標記物緩沖液中的生物素和三碘甲狀腺原氨酸抗體的偶聯物，其中三碘甲狀腺原氨酸抗體為小鼠單克隆抗體；所述生物素和三碘甲狀腺原氨酸抗體的偶聯物與生物素標記物緩沖液的稀釋比例為1:200～1:1000，優選的稀釋比例為1:500；所述生物素標記物緩沖液為20mM～200mMTris緩沖液，PH范圍為6.5～8.0，優選的濃度為20mM，優選的PH為8.0。

6.根據權利要求1或2所述的一種總三碘甲狀腺原氨酸磁微粒化學發光免疫定量檢測試劑盒，其特征在于：所述測試稀釋液為含有解離劑的緩沖液，其中解離劑為8-苯胺-1-萘磺酸（ANS），所述測試稀釋液的濃度范圍為0.01%～1%，優選的濃度為0.1%；所述緩沖液為20mM Tris緩沖液，PH為7.4；

所述三碘甲狀腺原氨酸校準品為含20%胎牛血清的校準品緩沖液，將三碘甲狀腺原氨酸純品稀釋至工作濃度，分別為0，0.50，1.00，2.00，4.00，8.00 ng/mL；校準品緩沖液為20mM Tris緩沖液，PH為7.4；

所述三碘甲狀腺原氨酸質控品為含20%胎牛血清的校準品緩沖液，將三碘甲狀腺原氨酸純品稀釋至工作濃度，分別為1.00，4.00ng/mL；所述質控品緩沖液為20mM Tris緩沖液，PH值為7.4。

7.根據權利要求1或2所述的一種總三碘甲狀腺原氨酸磁微粒化學發光免疫定量檢測試劑盒，其特征在于：所述三碘甲狀腺原氨酸衍生物為N-羥基琥珀酰亞胺(NHS) 和三碘甲狀腺原氨酸的化學合成物質，其化學結構式如下：

或所述三碘甲狀腺原氨酸衍生物N-磺酸化羥基琥珀酰亞胺(Sulfo-NHS)和三碘甲狀腺原氨酸的化學合成物質，其化學結構式如下：

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