[發(fā)明專利]一種藻紅蛋白熒光探針及其用于黃曲霉毒素B1快速檢測(cè)的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810543860.8
• 申請(qǐng)日: 2018-05-31
• 公開（公告）號(hào): CN108508214A
• 公開（公告）日: 2018-09-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭允權(quán);張文怡;莫柳達(dá);黃劍東;郭養(yǎng)浩;石賢愛(ài)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福州大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N21/64
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊;李翠娥

1.一種藻紅蛋白熒光探針的制備方法，其特征在于：按摩爾比為10~1:1往pH 為4.0~8.0、濃度為0.01~0.2 M磷酸鹽緩沖液中加入藻紅蛋白和黃曲霉毒素B1單克隆抗體，振蕩混勻；然后加入體積分?jǐn)?shù)為0.02%~0.6%的戊二醛，振蕩混勻后，在避光、溫度為5~50℃的條件下，勻速振蕩反應(yīng) 2~20 h，得到藻紅蛋白熒光探針。

2.一種如權(quán)利要求1所述的制備方法制得的藻紅蛋白熒光探針，其特征在于：所述的藻紅蛋白熒光探針含有1~10 μg/mL黃曲霉毒素B1單克隆抗體。

3.一種將權(quán)利要求2所述的藻紅蛋白熒光探針用于黃曲霉毒素B1快速檢測(cè)的方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）取10~100 μL、0.1-30ng/mL的黃曲霉毒素B1待測(cè)樣品，加入藻紅蛋白熒光探針10~80μL，混勻，反應(yīng)1~10 min；

2）將步驟1）的反應(yīng)液滴加至檢測(cè)卡孔中，層析時(shí)間為3~15 min，然后將檢測(cè)卡放入熒光免疫層析快速檢測(cè)設(shè)備中進(jìn)行檢測(cè)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藻紅蛋白熒光探針用于黃曲霉毒素B1快速檢測(cè)的方法，其特征在于：步驟2）所述的檢測(cè)卡的制備方法為：用0.01 mol/L、pH=7.0 磷酸鹽緩沖液分別稀釋羊抗鼠二抗和牛血清蛋白偶聯(lián)黃曲霉毒素B1抗原至0.1~10 mg/L、0.01~5 mg/L，然后將其均勻地畫在NC膜上，分別為質(zhì)控線和檢測(cè)線，在室溫下干燥5~10 h；最后在塑料底板上依次組裝NC膜、樣品墊、吸水墊，裝入檢測(cè)卡，放入密封袋中于4℃下保存以備用。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藻紅蛋白熒光探針用于黃曲霉毒素B1快速檢測(cè)的方法，其特征在于：步驟2）所述的熒光免疫層析快速檢測(cè)設(shè)備參數(shù)如下：

LED燈濾光片波長(zhǎng)為400~800 nm；相機(jī)濾光片的中心波長(zhǎng)為400~800 nm。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藻紅蛋白熒光探針用于黃曲霉毒素B1快速檢測(cè)的方法，其特征在于：步驟2）所述的熒光免疫層析快速檢測(cè)設(shè)備的檢測(cè)條件設(shè)定為：LED燈的電壓和電流分別為0.1~9 V和0.1~100 mA；相機(jī)的曝光時(shí)間為0.1~9 s。