[發明專利]促根抗鹽的碳氮磷協同菌群的篩選及協同菌劑的制備與應用

有效

• 申請號: 201810541787.0
• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108676751B
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發明（設計）人: 田永強;曹云娥;張雪艷;李建設;高艷明
• 申請（專利權）人: 寧夏大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/27;A01N63/20;A01P21/00;A01G22/05;A01G7/06;C12R1/41;C12R1/38;C12R1/01
• 代理公司: 北京化育知識產權代理有限公司 11833
• 代理人: 尹均利

一種促根抗鹽的碳氮磷協同菌群的篩選及協同菌劑的制備與應用，屬于環境生物技術領域，本方法首先將采集到的鹽堿地野生植物的根系樣品用活性保持型緩沖液進行清洗得到根系微生物樣品懸浮液，然后將根系微生物樣品懸浮液采用離心沉淀和微孔膜截留聯合法收集根際微生物樣品并制成固態微生物接種原料；接著利用專化高鹽缺碳液體培養基及生物活性和惰性碳源，篩選出固態微生物接種原料中的異效碳源利用型協同抗鹽菌群；進一步利用專化溶磷缺氮液體培養基，篩選出異效碳源利用型協同抗鹽菌群中的耐鹽的碳氮磷協同菌群；將耐鹽的碳氮磷協同菌群與微生物活性保持載體混合，制備出可促根抗鹽的碳氮磷協同菌群固態制劑。促進作物根系的抗鹽性并改善其生長。

技術領域

本發明屬于環境生物技術領域，具體涉及一種促根抗鹽的碳氮磷協同菌群的篩選及協同菌劑的制備與應用。

背景技術

目前，我國鹽漬化土地的面積高達1.8億畝，且呈逐年遞增的趨勢。以設施蔬菜土壤為例，其表層土壤中鹽分的含量是露地的7.9倍，設施菜田土壤鹽分的總量上升了69.3%。土壤鹽化已嚴重阻礙了作物的生長和種植業的可持續發展。因此，如何提高作物耐鹽性是促進我國種植業良性發展的面臨的重要問題之一。

淡水資源短缺是限制我國農業發展的一個重要因素。特別是黃淮海流域，水資源僅占全國8%，而耕地占40%，農業用水極度缺乏。為了緩解淡水資源危機，被動采用咸水灌溉已成為黃淮海流域多數地區不可避免的現實問題。但是，持續微咸水灌溉極易導致次生鹽漬化和作物減產。因此，如果在微咸水灌溉區域提高作物耐鹽性也是亟待解決的重要問題之一。

在鹽分累積下，一方面，土壤中的養分，特別是氮和磷，往往處于失效狀態而難以被作物根系吸收利用；另一方面，鹽分占比增大而碳庫占比下降，表現出明顯的高鹽低碳趨勢。土壤碳庫，特別是有機碳，不僅是土壤有機質的重要表征，而且是微生物發揮其功能的重要調節者；而有機質和微生物對調控作物生長有十分重要的作用。因此，提升土壤碳庫占比是阻控鹽漬化需首要解決的問題。其次，利用根際微生物與根系的協同促生效果，不僅可以通過活化土壤養分促進根系對養分的吸收，同時可以提高根系抗逆性且改善根系生長。

我國有9900多萬公頃的鹽堿地。雖然大多數作物不能在鹽堿地上生存，但一些耐鹽性野生植物在歷史的長河中存活、適應并繁衍后代。在長期的自然選擇過程中，鹽堿地野生植物根際微生物不斷進化，并很好地適應了鹽堿環境。在這些鹽堿地野生植物的根際微生物群落中，存在一些可潛在的提高作物耐鹽性的微生物種群。

現有的提高作物根系耐鹽性的微生物菌劑及其制備方法多集中在耐鹽性菌株的篩選上，但往往忽略了植物根系氮、磷、碳吸收的問題。

發明內容

有鑒于此，有必要提供一種能夠提高作物耐鹽性及促進根系吸收的促根抗鹽的碳氮磷協同菌群的篩選方法；

還有必要提供一種促根抗鹽的碳氮磷協同菌劑的制備方法；

還有必要提供一種促根抗鹽的碳氮磷協同菌劑的應用。

一種促根抗鹽的碳氮磷協同菌群的篩選方法，包括以下步驟：

采集樣品：采集鹽堿地野生植物的根系樣品；

制備固態微生物接種原料：將采集到的鹽堿地野生植物的根系樣品利用微生物活性保持型緩沖液進行沖洗，并將沖洗得到的根系樣品懸浮液進行離心過濾，得到離心沉淀和上清液，將得到的上清液放置于無菌的微孔膜中進行真空抽濾，然后將帶有微生物的微孔膜用無菌剪刀剪成碎片，放入至上述離心沉淀的離心管中，與離心沉淀混合后制得固態微生物接種原料；

篩選異效碳源利用型協同抗鹽菌群：將得到的固態微生物接種原料分成兩份，分別接種在專化高鹽缺碳液體培養基中，其中一份培養基中添加生物活性碳，另外一份添加生物惰性碳，篩選出異效碳源利用型協同抗鹽菌群；

篩選促根抗鹽的碳氮磷協同菌群：將篩選出的異效碳源利用型協同抗鹽菌群接種到專化溶磷缺氮液體培養基中，篩選出促根抗鹽的碳氮磷協同菌群；