[發明專利]促根抗鹽的碳氮磷協同菌群的篩選及協同菌劑的制備與應用

有效

• 申請號: 201810541787.0
• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108676751B
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發明（設計）人: 田永強;曹云娥;張雪艷;李建設;高艷明
• 申請（專利權）人: 寧夏大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/27;A01N63/20;A01P21/00;A01G22/05;A01G7/06;C12R1/41;C12R1/38;C12R1/01
• 代理公司: 北京化育知識產權代理有限公司 11833
• 代理人: 尹均利

1.一種促根抗鹽的碳氮磷協同菌群的篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：

采集樣品：采集鹽堿地野生植物的根系樣品；

制備固態微生物接種原料：將采集到的鹽堿地野生植物的根系樣品利用微生物活性保持型緩沖液進行沖洗，并將沖洗得到的根系樣品懸浮液進行離心過濾，得到離心沉淀和上清液，將得到的上清液放置于無菌的微孔膜中進行真空抽濾，然后將帶有微生物的微孔膜用無菌剪刀剪成碎片，放入至上述離心沉淀的離心管中，與離心沉淀混合后制得固態微生物接種原料；

篩選異效碳源利用型協同抗鹽菌群：將得到的固態微生物接種原料分成兩份，分別接種在專化高鹽缺碳液體培養基中，其中一份培養基中添加生物活性碳，另外一份添加生物惰性碳，篩選出異效碳源利用型協同抗鹽菌群；

篩選促根抗鹽的碳氮磷協同菌群：將篩選出的異效碳源利用型協同抗鹽菌群接種到專化溶磷缺氮液體培養基中，篩選出促根抗鹽的碳氮磷協同菌群；

所述專化高鹽缺碳液體培養基的配方為：磷酸氫二鉀1.5886克、磷酸二氫鉀0.3919克、二水氯化鈣0.06克、七水硫酸鎂0.48克、一水硫酸錳2.52克、七水硫酸亞鐵0.014克、七水硫酸鋅0.35克、五水硫酸銅0.35克、硼酸0.35克、二水鉬酸鈉0.065克、硫酸銨1.704克、氯化鈉25克、去離子水1升、pH7.0；

所述專化溶磷缺氮液體培養基的配方為：葡萄糖12克、磷酸鈣5.5克、七水硫酸鎂0.2克、六水氯化鎂4.5克、氯化鉀0.25克、1.0毫升微量元素溶液、2.05% EDTA鐵鹽溶液5毫升、1.0毫升維生素溶液、氫氧化鉀4.5克、去離子水1升、pH7.0；

所述植物根系為野生檉柳、結縷草和堿蓬的根系；

所述制備固態微生物接種原料步驟中使用的微生物活性保持型緩沖液的配方為：磷酸氫二鉀0.6618克、磷酸二氫鉀0.1633克、硫酸鎂0.1克、氯化鈉6.5克、無菌水1升、pH7.0。

2.如權利要求1所述的促根抗鹽的碳氮磷協同菌群的篩選方法，其特征在于：在所述篩選異效碳源利用型協同抗鹽菌群步驟中一份培養基中添加的生物活性碳由質量比為1:1的小麥和玉米秸稈組成，添加量為1.3克/升，一升的培養基中添加1.3克的生物活性碳源，所述的生物惰性碳為生物碳，其添加量為5克/升。

3.一種促根抗鹽的碳氮磷協同菌劑的制備方法，其特征在于：將權利1-2任意一項所述的篩選方法篩選出的促根抗鹽的碳氮磷協同菌群與微生物活性保持載體混合制備出促根抗鹽的碳氮磷協同菌劑。

4.如權利要求3所述的促根抗鹽的碳氮磷協同菌劑的制備方法，其特征在于：所述微生物活性保持載體的配方為每100克總載體中含有10克小麥秸稈、10克玉米秸稈、20克生物炭、50克花生餅粉、9.18克棉粕、0.5克蛋白胨、0.3克葡萄糖、0.02克七水硫酸鎂。

5.一種促根抗鹽的碳氮磷協同菌劑的應用，其特征在于：將采用權利要求3、4任意一項所述的制備方法制備得到的促根抗鹽的碳氮磷協同菌劑在蔬菜育苗和栽培定植中根據需要添加，蔬菜育苗中的添加量為基質質量的6%；在作物定植后，該菌劑的施用量為400公斤/畝。