[發明專利]一種檢測黃樟素的試紙條及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810540551.5
• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108931646B
• 公開（公告）日: 2021-04-27
• 發明（設計）人: 陳黎;劉惠民;趙樂;崔華鵬;樊美娟;聶聰;張曉兵;謝復煒;潘立寧;王曉瑜
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/532
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

1.一種檢測黃樟素的試紙條，包括樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊和底板；其特征在于，所述反應膜上具有包被有黃樟素半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線，所述結合物釋放墊上噴涂有黃樟素單克隆抗體-膠體金標記物；所述黃樟素單克隆抗體是以黃樟素半抗原-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得；所述黃樟素半抗原-載體蛋白偶聯物由黃樟素半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、鑰孔血藍蛋白或人血清白蛋白，所述黃樟素半抗原是由5-(2-溴-2-丙烯-1-基)-1,3-苯并二氧戊環與氨基丙酸反應得到的，其分子結構式為：

，

所述黃樟素半抗原的制備反應過程如下：

黃樟素半抗原的具體制備方法如下：取5-(2-溴-2-丙烯-1-基)-1,3-苯并二氧戊環1.0g，加無水二甲基亞砜50 mL溶解，攪拌澄清，加氫氧化鉀0.48 g，加無水碘化鈉0.20 g，劇烈攪拌后，加氨基丙酸0.41 g，100℃反應4h；停止反應，加水50 mL，加1mol/L鹽酸調節pH值到6，加乙酸乙酯80 mL，萃取三次，合并有機相，旋蒸蒸干，上硅膠柱，用體積比為1:5的乙酸乙酯/石油醚洗脫分離，得到半抗原產物丙酸黃樟素0.91g。

2.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊依次粘貼在底板上。

3.根據權利要求1或2任一項所述的試紙條，其特征在于，所述結合物釋放墊1/3~1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。

4.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述羊抗鼠抗抗體是以鼠源抗體為免疫原對山羊進行免疫制備獲得。

5.一種制備權利要求1-4任一項所述試紙條的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1）制備噴涂有黃樟素單克隆抗體-膠體金標記物的結合物釋放墊；

2）制備具有包被有黃樟素半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線的反應膜；

3）將1）和2）制備好的結合物釋放墊、反應膜與樣品吸收墊、吸水墊和底板組裝成試紙條。

6.一種應用權利要求1-4任一項所述試紙條檢測樣品中黃樟素的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1）對樣品進行前處理；

2）用所述試紙條對樣品進行檢測；

3）分析檢測結果。