[發(fā)明專利]一種板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810536673.7
• 申請(qǐng)日: 2018-05-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108719066A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 史永弟;梁永琪;段珍珍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 甘肅源宜生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京紐樂(lè)康知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11210
• 代理人: 蘇泳生

本發(fā)明公開(kāi)了一種板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括以下步驟：取板藍(lán)根種子，清洗并滅菌后培養(yǎng)得到板藍(lán)根幼苗，挑選幼嫩的板藍(lán)根葉片或子葉節(jié)作為外植體，誘導(dǎo)愈傷組織與不定芽，將愈傷組織或不定芽進(jìn)行繼代增殖，產(chǎn)生叢生芽，叢生芽轉(zhuǎn)接到無(wú)糖培養(yǎng)容器中進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到生根的板藍(lán)根苗，然后進(jìn)行練苗與移栽。本發(fā)明的板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法可以為板藍(lán)根優(yōu)良品種的選育和菜用板藍(lán)根工廠化生產(chǎn)提供理論與技術(shù)支撐，其優(yōu)勢(shì)在于可快速脫毒并繁殖、操作方式簡(jiǎn)單，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益與生態(tài)效益。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物細(xì)胞工程技術(shù)領(lǐng)域，具體來(lái)說(shuō)，涉及一種板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

背景技術(shù)

板藍(lán)根是一種主產(chǎn)于中國(guó)的常用中草藥，常用別名有靛青根、藍(lán)靛根、大青根，是十字花科植物菘藍(lán)(Isatis tinctoria L.)的根，通常在秋季進(jìn)行采挖，炮制后可入藥，其味先微甜后苦澀，性寒，歸心、肝、胃經(jīng)，具有清熱解毒、預(yù)防感冒、利咽之功效。主要用于治療溫毒發(fā)斑、大頭瘟疫、舌絳紫暗、爛喉丹痧、痤瘡等疾病，藥用價(jià)值極高。根據(jù)利用方式，地上部分稱為板藍(lán)根，以葉入藥的稱為大青葉，在生活中以鮮葉作為菜用的稱為菜用板藍(lán)根，板藍(lán)根食用價(jià)值高，芽苗菜具有清熱解毒、排毒養(yǎng)顏的功效，其口感清淡，略帶苦味，即可涼拌，也可炒菜、做湯，是一種保健蔬菜。菜用板藍(lán)根一年四季均可栽培，可有效利用土地，同時(shí)增加農(nóng)民收入。

我國(guó)板藍(lán)根種植區(qū)，品種復(fù)雜且混亂，市場(chǎng)上偽劣品比較多，嚴(yán)重影響藥廠投料的真實(shí)性及臨床療效。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)相關(guān)技術(shù)中的上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提出一種板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，能夠克服現(xiàn)有技術(shù)的上述不足。

為實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一種板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括以下步驟：

(1)準(zhǔn)備外植體：取板藍(lán)根種子，清洗并滅菌后放入MS或1/2MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到板藍(lán)根幼苗，挑選幼嫩的板藍(lán)根葉片或子葉節(jié)作為外植體；

(2)愈傷組織的誘導(dǎo)及芽分化：將幼嫩的板藍(lán)根葉片或子葉節(jié)清洗并滅菌，切口向下栽在培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)愈傷組織與不定芽；

(3)繼代增殖：將步驟(2)得到的愈傷組織或不定芽轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代增殖，產(chǎn)生叢生芽；

(4)生根培養(yǎng)：將步驟(3)得到的叢生芽轉(zhuǎn)接到無(wú)糖培養(yǎng)容器中進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到生根的板藍(lán)根苗；

(5)練苗與移栽：打開(kāi)無(wú)糖培養(yǎng)容器的蓋子，將生根后的板藍(lán)根苗在室溫放置一天，然后澆水并在室溫放置5-6天，將生根后的板藍(lán)根苗分成單株取出后栽于苗床。

進(jìn)一步的，所述幼嫩的板藍(lán)根葉片清洗及滅菌的具體操作為：將幼嫩的板藍(lán)根葉片用洗潔精洗干凈后，流水沖12h；75％酒精消毒30s，無(wú)菌蒸餾水沖洗3次；0.1％升汞震搖8-10min，無(wú)菌蒸餾水沖洗4-6次，5min/次。

進(jìn)一步的，所述幼嫩的板藍(lán)根葉片清洗及滅菌的具體操作為：將幼嫩的板藍(lán)根葉片用洗潔精洗干凈后，流水沖12h，暗處理6h；75％酒精消毒30s，無(wú)菌蒸餾水沖洗3次；10％-20％體積分?jǐn)?shù)的84消毒液震搖30min，無(wú)菌蒸餾水沖洗4-6次，5min/次。

進(jìn)一步的，所述子葉節(jié)清洗及滅菌的具體操作為：將子葉節(jié)用洗潔精清洗沖干凈后，75％酒精消毒30s，無(wú)菌蒸餾水沖洗3次；0.1％升汞震搖5-8min，無(wú)菌蒸餾水沖洗4-6次，5min/次。

進(jìn)一步的，所述愈傷組織的誘導(dǎo)及芽分化采用的培養(yǎng)基為MS、0.06-0.08mg/LTDZ、0.4mg/L NAA、30g/L白砂糖、5.8g/L瓊脂組合的pH5.8-5.9的培養(yǎng)基。