[發(fā)明專利]一種板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810536673.7
• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108719066A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 史永弟;梁永琪;段珍珍
• 申請（專利權(quán)）人: 甘肅源宜生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紐樂康知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11210
• 代理人: 蘇泳生

1.一種板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）準(zhǔn)備外植體：取板藍(lán)根種子，清洗并滅菌后放入MS或1/2MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到板藍(lán)根幼苗，挑選幼嫩的板藍(lán)根葉片或子葉節(jié)作為外植體；

（2）愈傷組織的誘導(dǎo)及芽分化：將幼嫩的板藍(lán)根葉片或子葉節(jié)清洗并滅菌，切口向下栽在培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)愈傷組織與不定芽；

（3）繼代增殖：將步驟（2）得到的愈傷組織或不定芽轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代增殖，產(chǎn)生叢生芽；

（4）生根培養(yǎng)：將步驟（3）得到的叢生芽轉(zhuǎn)接到無糖培養(yǎng)容器中進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到生根的板藍(lán)根苗；

（5）練苗與移栽：打開無糖培養(yǎng)容器的蓋子，將生根后的板藍(lán)根苗在室溫放置一天，然后澆水并在室溫放置5-6天，將生根后的板藍(lán)根苗分成單株取出后栽于苗床。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述幼嫩的板藍(lán)根葉片清洗及滅菌的具體操作為：將幼嫩的板藍(lán)根葉片用洗潔精洗干凈后，流水沖12h；75%酒精消毒30s，無菌蒸餾水沖洗3次；0.1%升汞震搖8-10min，無菌蒸餾水沖洗4-6次，5min/次。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述幼嫩的板藍(lán)根葉片清洗及滅菌的具體操作為：將幼嫩的板藍(lán)根葉片用洗潔精洗干凈后，流水沖12h，暗處理6h；75%酒精消毒30s，無菌蒸餾水沖洗3次；10%-20%體積分?jǐn)?shù)的84消毒液震搖30min，無菌蒸餾水沖洗4-6次，5min/次。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述子葉節(jié)清洗及滅菌的具體操作為：將子葉節(jié)用洗潔精清洗沖干凈后，75%酒精消毒30s，無菌蒸餾水沖洗3次；0.1%升汞震搖5-8min，無菌蒸餾水沖洗4-6次，5min/次。

5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述愈傷組織的誘導(dǎo)及芽分化采用的培養(yǎng)基為MS、0.06-0.08 mg/L TDZ 、0.4 mg/L NAA、30g/L白砂糖、5.8g/L瓊脂組合的pH5.8-5.9的培養(yǎng)基。

6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述繼代培養(yǎng)基為MS+0.1mg/L TDZ+0.4mg/L NAA+30g/L白砂糖+5.8g/L瓊脂，pH5.8-5.9的培養(yǎng)基。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的板藍(lán)根的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)容器中的培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基。