[發明專利]西瓜肉色主效基因及其InDel分子標記和應用有效
| 申請號: | 201810532822.2 | 申請日: | 2018-05-29 |
| 公開(公告)號: | CN108676905B | 公開(公告)日: | 2021-08-24 |
| 發明(設計)人: | 尚建立;馬雙武;閆勸勸;李娜;王吉明;周丹;李楠楠 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院鄭州果樹研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 河南科技通律師事務所 41123 | 代理人: | 張曉輝;樊羿 |
| 地址: | 450009 河南*** | 國省代碼: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 西瓜 肉色 基因 及其 indel 分子 標記 應用 | ||
1.一種西瓜肉色主效基因的InDel分子標記的引物,其特征在于,所述分子標記在基因Cla018767上,位于西瓜6號染色體21861691bp處,其核苷酸序列為GAGCCCGAGCCC;其上游引物序列為GACCCTGCATACGAGCCT;
下游引物序列為GGGATTGGAGCTGGAATT。
2.一種西瓜肉色基因型的鑒定方法,包括以下步驟:
(1)采用CTAB法提取西瓜葉片DNA;
(2)PCR擴增:利用權利要求1所述的引物,對待測樣品利用如下擴增體系進行PCR擴增:西瓜葉片總DNA 1μL、權利要求1所述上游引物 1μL、權利要求1所述下游引物 1μL、2 ×Power Taq PCR MasterMix 12.5μL、ddH2O 9.5μL;
擴增程序為:94℃、5min;94℃、20s,55℃、1min,72℃、30s,共35個循環;72℃、5min;
(3)對PCR產物進行8%聚丙烯酰胺凝膠電泳,顯影、染色和帶型判讀,在179bp有條帶,即為紅肉西瓜;在167bp有條帶,即為粉肉西瓜。
3.權利要求1所述的分子標記的引物在西瓜肉色輔助選擇中的應用。
4.權利要求2所述的方法在西瓜肉色輔助選擇中的應用。
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