[發(fā)明專利]豬肉中磺胺類獸藥殘留基體標準物質(zhì)的定值方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810532814.8
• 申請日: 2018-05-29
• 公開（公告）號: CN108931593A
• 公開（公告）日: 2018-12-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李蘭英;聞艷麗;李杰;孟嬌然;劉剛;梁文;李妍;王樂樂
• 申請（專利權(quán)）人: 上海市計量測試技術(shù)研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發(fā)明提供了豬肉中磺胺類獸藥殘留基體標準物質(zhì)的定值方法，所述方法包括基體標準物質(zhì)預(yù)處理的步驟；所述預(yù)處理包括：(1)提取：向基體標準物質(zhì)中加入提取溶劑進行目標物的提取，得到的上清液過無水硫酸鈉柱，得到提取物；(2)凈化：將步驟(1)所述提取物經(jīng)水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，采用流動相定容溶解，采用液?液分配凈化法進行凈化，過濾后得到預(yù)處理的基體標準物質(zhì)；其中，所述無水硫酸鈉柱提前采用乙腈浸潤；所述流動相提前采用正己烷飽和。本發(fā)明的方法采用正己烷飽和的流動相進行定容磺胺類獸藥殘留基體標準物質(zhì)的提取物，減少了液?液分配時提取液中的磺胺類藥物分配到有機相中，磺胺類藥物的回收率在95.7％?104.8％之間，相對標準偏差小于5％(n＝6)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及豬肉中磺胺類獸藥殘留基體標準物質(zhì)的定值方法。

背景技術(shù)

磺胺類獸藥是一類具有對氨基苯磺酰胺結(jié)構(gòu)的抗菌藥物的總稱，具有抗菌譜系廣、抗菌能力強、價格低廉等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療食源性動物的感染性疾病。然而，長期食用含有磺胺類獸藥的動物源食品容易引起過敏反應(yīng)，影響泌尿系統(tǒng)功能，發(fā)生結(jié)晶尿、血尿等癥狀，破壞機體正常菌群的生態(tài)平衡，造成細菌抗藥性等不良后果。磺胺類獸藥是除“瘦肉精”外，殘留量最容易超標的獸藥之一，目前，中國、國際食品法典委員會(CAC)、歐盟和美國已將磺胺類藥物列為動物飼養(yǎng)過程中限制使用的藥物，并限定動物源食品中磺胺類藥物的最大殘留限量(MRL)為0.1mg/kg。我國農(nóng)業(yè)部也嚴格監(jiān)控磺胺類獸藥的殘留量，自1999年實施國家獸藥殘留監(jiān)控計劃以來，始終將磺胺類獸藥列為國家獸藥殘留監(jiān)控指標之一。

磺胺類獸藥殘留基體標準物質(zhì)一般通過養(yǎng)殖給藥的方式獲得，目標物(磺胺)和基體(豬肉)的結(jié)合形式與真實樣品完全一致，不僅可以有效避免分析過程中基體對目標物的影響，而且可以在不同時間與空間內(nèi)保證磺胺檢測結(jié)果的一致性與可比性，是實現(xiàn)磺胺準確定量和溯源的物質(zhì)基礎(chǔ)。建立一種準確性高的磺胺定值方法在研制磺胺類獸藥殘留基體標準物質(zhì)中具有重要意義。

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)是目前磺胺檢測的最主要的確證方法，但是由于豬肉中的脂肪含量和蛋白含量較高，前處理過程繁瑣，顯著影響了測定結(jié)果的可靠性和準確性。文獻報道的LC-MS/MS的加標回收率一般為70％-110％，結(jié)果標準偏差一般為15％-30％，無法滿足基體標準物質(zhì)的定值要求(“超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定豬肉中磺胺類藥物殘留量”，楊梅等，《食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報》，第8卷，第3633-3638頁，2017年)。

CN 101949898 A公開了一種動物源性食品中多種堿性藥物殘留量的檢測方法，所述方法通過乙腈、異丙醇和檸檬酸緩沖溶液渦旋混合提取、親水性聚苯乙烯-二乙烯基苯固相萃取柱和陽離子交換固相萃取柱凈化及液相色譜-質(zhì)譜測定來檢測豬肉、豬肝、雞蛋、蝦、牛奶中多種堿性藥物如β-受體激動劑類、磺胺類、苯二氮卓類、硝基咪唑類、苯并咪唑類、三苯甲烷類的殘留量，然而該方法未去除提取溶劑中的水分，顯著影響了藥物的相對回收率和相對標準偏差，藥物的相對回收率僅為63.1％-109.0％，相對標準偏差為1.6％-23.0％，無法滿足基體標準物質(zhì)的定值要求。

CN 102175784 A公開了固相萃取-液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法同時測定豬肉中54種藥物殘留的方法，所述方法通過乙腈提取，正己烷脫脂，再用C₁₈固相萃取小柱凈化，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法(LC-MS/MS)測定，同位素內(nèi)標稀釋內(nèi)標法和外標法定量，回收率范圍為21.1％-121％，相對標準偏差小于19.8％，可作為篩選方法應(yīng)用于豬肉中磺胺類、硝基咪唑類、喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類和吡喹酮共計54種藥物殘留的同時測定，然而該方法的回收率和相對標準偏差仍有待于進一步優(yōu)化。

因此，提供一種準確性好、回收率高、相對標準偏差小的檢測方法，用于磺胺類獸藥殘留基體標準物質(zhì)的定值，在食品檢驗領(lǐng)域具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容