[發明專利]一種檢測苯丙胺的試紙條及其制備方法和應用方法

在審

• 申請號: 201810532305.5
• 申請日: 2018-05-29
• 公開（公告）號: CN108845152A
• 公開（公告）日: 2018-11-20
• 發明（設計）人: 賈嘉;張振興;呂小翠;趙琳;周亮;崔浩哲;張鵬;高翔
• 申請（專利權）人: 鄭州左安檢測科技有限公司
• 主分類號: G01N33/94
• 分類號: G01N33/94;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/533
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 趙娟

本發明公開了一種檢測苯丙胺的試紙條及其制備方法和應用。該試紙條構成依次包括樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊和底板；結合物釋放墊上噴涂有時間分辨熒光微球標記的抗體；所述的反應膜上包被有半抗原?載體蛋白偶聯物的檢測線和羊抗鼠二抗的質控線；本發明以時間分辨熒光微球標記抗體，采用免疫層析技術，實現苯丙胺的快速免疫分析。本發明還提供一種應用上述試紙條檢測樣品中苯丙胺的方法。本發明的優點是靈敏度高，可準確定量，檢測快速、操作方便，經濟實用，能夠實現對大批量的苯丙胺樣品進行快速檢測和現場檢測。

技術領域

本發明涉及苯丙胺的檢測，具體是一種利用時間分辨熒光微球免疫層析技術定量檢測苯丙胺的試紙條及其制備方法和應用方法。

背景技術

苯丙胺，即安非他命，是一系列對中樞神經系統具有顯著興奮作用的合成藥物的原型。因靜脈注射具有成癮性，而被列為毒品。苯丙胺引起的不良反應有過度興奮、不安、失眠、震顫、緊張和煩躁等癥狀。對苯丙胺的軀體耐受性出現的非?？?，所以長期服用者必須越服用越多。服用大劑量苯丙胺后最嚴重的后果就是一種毒性神經病，其癥狀類似類偏執型精神分裂癥。苯丙胺的濫用常和巴比妥藥物及酒精的濫用一同發生。苯丙胺超量或反復使用可產生病態嗜好，并引起興奮與抑制過程的平衡失調而導致精神癥狀，故使用應嚴加控制。

目前針對苯丙胺的檢測和監控方法主要包括高效液相色譜、氣相色譜、液質或氣質連用等。這些色譜方法具有很好的靈敏度和特異性，但操作復雜，通量不高，耗時較長，儀器設備昂貴。酶聯免疫吸附測定(ELISA)以及膠體金免疫層析法是目前國際公認的主流技術，這兩種方法具有檢測速度快，價格便宜，操作簡單等優點。但ELISA檢測仍需專業人員，且需要較長時間顯示結果；膠體金法能對苯丙胺進行定性分析，操作簡單，檢測時間較短，但靈敏度低、人為因素干擾較大。

綜上所述，目前苯丙胺的檢測技術尚不成熟，開發一種靈敏度高、操作簡便并且能夠實現對大批量樣品進行快速檢測的產品和方法成為迫切需要解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于克服現有的檢測苯丙胺的方法存在的操作復雜、耗時較長，并且不能夠實現對大批量樣品的快速檢測的特點，提供一種操作簡單、靈敏度高、檢測速度快、成本低的檢測苯丙胺的試紙條及其制備方法和應用方法，以實現對大批量的苯丙胺樣品進行快速檢測和現場監控。

為了實現本發明的目的，本發明的一種檢測苯丙胺的試紙條采用以下技術方案：一種檢測苯丙胺的試紙條，包括樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊和底板；其特征在于：所述的結合物釋放墊上噴涂有時間分辨熒光微球標記的抗體；所述反應膜上包被有半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和羊抗鼠二抗的質控線。

所述樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜和吸水墊均粘貼在底板上且中任意相鄰兩個沿上下方向部分疊加，結合物釋放墊的1/3-1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。

所述時間分辨熒光微球是直徑為100 nm-500 nm的稀土離子作為標記物的熒光微球，其表面修飾有功能基團，用于蛋白、抗體和核酸的共價偶聯。

所述時間分辨熒光微球的激發波長為300-400 nm，發射波長為500-700 nm。

所述樣品吸收墊為玻璃纖維素膜。

所述結合物釋放墊為玻璃纖維或聚酯材料。

所述反應膜為硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜。

所述底板為PVC底板或其他硬質不吸水的材料。

所述吸水墊為吸水紙。

本發明的一種制備上述檢測苯丙胺的試紙條的方法，包括以下步驟：

1）用熒光微球標記苯丙胺抗體，并將其噴涂在結合物釋放墊上，以制備噴涂有苯丙胺單克隆抗體-熒光微球標記物的結合物釋放墊；