[發明專利]一種利用響應面法結合遺傳算法和直接搜索算法優化的丹梔逍遙散的提取方法

有效

• 申請號: 201810531837.7
• 申請日: 2018-05-29
• 公開（公告）號: CN108714170B
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發明（設計）人: 蘇本正
• 申請（專利權）人: 山東省中醫藥研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G06N3/12;G16C20/10;A61K36/744;A61P1/16;A61P1/14
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

本發明屬于化合物提取技術領域，具體涉及一種利用響應面法結合遺傳算法和直接搜索算法優化的丹梔逍遙散的提取方法。該方法具體為：（1）選擇梔子苷、芍藥苷和丹皮酚為指標成分，采用高效液相色譜法進行指標成分含量測定；（2）混合對照品溶液的制備；（3）供試品溶液的制備；（4）標準曲線的建立；（5）實驗設計與統計分析；（6）遺傳算法搜索分析；（7）直接搜索法搜索分析。本發明先采用BBD?響應面優化法建立數學模型、獲得目標函數后，使用遺傳算法及直接搜索算法搜索各因素的精確最優值。本發明選取梔子苷、芍藥苷及丹皮酚為指標成分，結合本發明優化的提取方法，能夠實現對丹梔逍遙散進行最大程度的提取，具有重要的研究意義。

技術領域

本發明屬于化合物提取技術領域，具體涉及一種利用響應面法結合遺傳算法和直接搜索算法優化的丹梔逍遙散的提取方法。

背景技術

逍遙散出自《太平惠民和劑局方》，方由當歸、茯苓、白術、柴胡、芍藥、煨姜、薄荷、炙甘草組成。明·薛己在此基礎上加牡丹皮和梔子，名加味逍遙散，又名丹梔逍遙散。具有養血健脾，疏肝清熱之功用，是調和肝脾的代表方劑，是臨床常用復方。因此，對丹梔逍遙散主要成分（含量高）和重要免疫活性成分的提取具有重要的研究價值。現有技術中，尚未有利用響應面法結合遺傳算法和直接搜索算法優化提取復方丹梔逍遙散的相關報道。

發明內容

針對現有技術中存在技術空白的問題，本發明提供了一種利用響應面法結合遺傳算法和直接搜索算法優化的丹梔逍遙散的提取方法。

本發明為了實現上述目的所采用的技術方案為：

本發明提供了一種利用響應面法結合遺傳算法和直接搜索算法優化的丹梔逍遙散的提取方法，包括以下步驟：

（1）選擇梔子苷、芍藥苷和丹皮酚為指標成分，采用高效液相色譜法進行指標成分含量測定；

（2）混合對照品溶液的制備：精密稱定梔子苷、芍藥苷及丹皮酚對照品，加適量甲醇制成終濃度分別為74.9、56.2及33.4 μg/mL的混合對照品溶液；

（3）供試品溶液的制備：分別精密稱取過4號篩的柴胡0.5 g、當歸0.5 g、茯苓0.5g、白芍0.5 g、白術0.5 g、薄荷0.1 g、甘草0.4 g、牡丹皮0.75 g和梔子0.75 g藥材粉末組成復方，按照液料比為（5-30）：1mL/g加入20-80%乙醇溶液，加熱回流提取1-4次，提取時間為1.5-4h，提取液濾過后放冷、補足失重，離心，取1 mL上清液，用甲醇定容至10 mL容量瓶，微孔濾膜濾過后作為供試品溶液；

（4）標準曲線的建立：取混合對照品溶液，進行HPLC檢測，分別進樣1、2、4、6、8、10、20 μL，以質量濃度（μg）為橫坐標（x），以峰面積為縱坐標（y）進行線性回歸：梔子苷的回歸方程為y=1483728x-12051（r=0.99995）；芍藥苷的回歸方程為y=927308x-20630（r=0.9975）；丹皮酚的回歸方程為y=5116603x-44372（r=0.9999）；