[發(fā)明專利]巨大戟烷型二萜的制備方法及其在制藥中的用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810531194.6
• 申請(qǐng)日: 2018-05-29
• 公開（公告）號(hào): CN110540504B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳道峰;黃雅思;盧燕;李國雄
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號(hào): C07C67/48
• 分類號(hào): C07C67/48;C07C69/33;A61K31/23;A61K36/47;A61P31/18
• 代理公司: 上海元一成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

本發(fā)明屬中藥制藥領(lǐng)域，涉及巨大戟烷型二萜的制備方法及其在制備抗艾滋病毒藥物中的用途。本發(fā)明從大戟屬(Euphorbia)植物月腺大戟(Euphorbia ebracteolata)中富集巨大戟烷型二萜類成分，并進(jìn)行主要活性成分含量測(cè)定及抗HIV活性測(cè)試，結(jié)果顯示：隨著巨大戟烷型二萜成分含量的增加，抗HIV活性呈明顯上升趨勢(shì)；當(dāng)富集組分中巨大戟烷型總二萜含量大于47％時(shí)，即顯示極強(qiáng)的抗HIV活性，EC₅₀值達(dá)0.0063μg/mL，且細(xì)胞毒性較小(CC₅₀＝14)，選擇指數(shù)(SI)大于2000，與陽性對(duì)照藥物齊多夫定相比具有明顯的優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明建立了從月腺大戟中快速富集巨大戟烷型總二萜的方法，且富集的巨大戟烷型總二萜可用于制備抗艾滋病毒藥物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬中藥制藥領(lǐng)域，涉及月腺大戟中的巨大戟烷型總二萜的制備方法和在制藥中的用途，具體涉及一種從月腺大戟中富集巨大戟烷型總二萜類成分的方法及其在制備抗艾滋病毒藥物中的用途。

背景技術(shù)

月腺大戟(Euphorbia ebracteolata Hayata)為大戟科(Euphorbiaceae)大戟屬多年生草本植物，主要產(chǎn)于河南、山東、江蘇、安徽、浙江、福建等省，作為中藥狼毒的原植物之一，其根入藥。狼毒始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，主治水腫腹脹，痰、食、蟲積、心腹疼痛，咳喘、瘰疬、痰核、疥癬、滅蠅蛆，近年來，民間將狼毒廣泛用于淋巴結(jié)核、皮膚病和慢性支氣管炎的治療，取得了較好的治療效果，并形成了固定的處方和劑型。

現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)月腺大戟具有抑菌、抗腫瘤等活性，提示著月腺大戟具有潛在的重要藥用價(jià)值。特別是近年來，有研究在月腺大戟中發(fā)現(xiàn)具有抗HIV活性的巨大戟烷型二萜類化合物，該類二萜化合物具有抗HIV活性強(qiáng)，細(xì)胞毒性小，治療指數(shù)高等特點(diǎn)，但實(shí)踐顯示，該類二萜的極性特別小，與月腺大戟中的油脂類化合物的極性極為相近導(dǎo)致很難與它們分離，因此，建立快速從月腺大戟中富集巨大戟烷型二萜類化合物的方法引起本領(lǐng)域技術(shù)人員的關(guān)注。

基于現(xiàn)有技術(shù)的現(xiàn)狀，本申請(qǐng)的發(fā)明人擬提供一種從月腺大戟中快速富集巨大戟烷型總二萜類成分的方法，本方法將對(duì)研制高效低毒的抗艾滋病毒藥物提供基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供巨大戟烷型總二萜的制備方法及其在制藥中的用途，具體涉及從月腺大戟中富集巨大戟烷型總二萜類成分的方法及其在制備抗艾滋病毒藥物中的用途。

本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的采用的技術(shù)方案是：

一種從月腺大戟中制備抗艾滋病毒的巨大戟烷型總二萜的方法，其包括以下步驟：

(1)將月腺大戟根與有機(jī)溶劑按適當(dāng)比例混合，提取數(shù)次，合并提取液，濃縮回收溶劑并蒸干，得浸膏；所述的有機(jī)溶劑選自甲醇、或乙醇、或乙腈、或丙酮；所述的提取選自加熱回流提取、或閃式提取、或超聲提取、或滲漉提取；

(2)將步驟(1)中所得的浸膏以水混懸后，用有機(jī)溶劑萃取數(shù)次，合并萃取液，濃縮回收溶劑并蒸干，得萃取物；所述的有機(jī)溶劑選自石油醚、或環(huán)已烷、或正已烷、或乙酸乙酯；

(3)步驟(2)中所得萃取物通過正相硅膠柱色譜或高速逆流柱色譜得到下一步產(chǎn)物；

采用的正向硅膠柱色譜的方法為：取萃取物，分別用8-10倍柱體積石油醚：丙酮＝10：1，5：1，3：1或石油醚：乙酸乙酯＝5：1，2：1，1洗脫，收集石油醚：丙酮＝5：1或石油醚：乙酸乙酯＝2：1的洗脫部分；

采用的高速逆流柱色譜的方法為：選用石油醚：乙酸乙酯：甲醇：水＝4:1:4:1系統(tǒng)，上相(石油醚-乙酸乙酯)為固定相，下相(甲醇-水)為流動(dòng)相，在流速為1～2mL/min、主機(jī)轉(zhuǎn)速為600～1000r/min條件下分配，根據(jù)HPLC確定巨大戟烷型二萜復(fù)合物的出峰位置，收集所在的流出液，濃縮回收溶劑并蒸干；