[發明專利]一種人字果藥材中木蘭花堿的含量測定方法

有效

• 申請號: 201810523737.X
• 申請日: 2018-05-28
• 公開（公告）號: CN108693289B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 徐文芬;柏彩紅;王波;孫慶文;李云超
• 申請（專利權）人: 貴陽中醫學院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京聯創佳為專利事務所(普通合伙) 11362
• 代理人: 郭防;張梅

本發明公開了一種人字果藥材中木蘭花堿的含量測定方法，所述木蘭花堿的含量測定方法為：色譜條件：Pntulips BP?C₁₈柱（4.6mm×250mm，2.5μm）；流動相：流動相A為乙腈，流動相B為0.1%磷酸?0.1%三乙胺水溶液，梯度洗脫；檢測波長：260~280 nm；柱溫：20~30℃；流速：0.8~1.2mL·min^?1；進樣量：5~20μL。本發明以木蘭花堿為測定指標，采用高效液相色譜法，建立人字果藥材的含量測定方法，為人字果藥材的質量標準研究提供實驗依據；所述測定方法準確，靈敏度高，重復性好，結果可靠，為人字果藥材質量控制和評價提供依據。

技術領域

本發明涉及一種人字果藥材中木蘭花堿的含量測定方法，屬于藥品技術的領域。

背景技術

人字果藥材為毛茛科植物蕨葉人字果Dichocarpum dalzielii(J.R.DrummondHutchinson)W.T.WangP.K.Hsiao的干燥全草，具有清熱解毒、消腫止痛等功效，用于跌打腫痛、無名腫毒等病癥。2015年貴州食品藥品監督管理局立項進行2003版《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》修訂研究，將人字果列為新增補藥材品種，開展其質量標準研究。通過文獻查閱分析，蕨葉人字果的研究報道較少，僅見分類學研究，其化學成分、藥理作用等方面研究尚屬空白。本實驗首先運用液質聯用技術對人字果藥材中化學成分的結構進行鑒定，主要含有生物堿類和黃酮類等多種成分，經質譜數據及文獻資料，推測該藥材中可能含有木蘭花堿，通過與木蘭花堿對照品質譜數據比對，確定該藥材中含有木蘭花堿。木蘭花堿為人字果藥材的主要成分，具有良好的促成骨細胞活性以及抗心律失常、抗炎、降壓和消除運動性疲勞等作用。目前未見關于人字果藥材中木蘭花堿含量測定方法的研究報道，限制了對人字果的進一步開發利用。另外，沒有對其藥效成分進行定量檢測，難以控制藥材及其成方制劑的質量，無法保證臨床用藥的安全性和有效性。

發明內容

本發明目的在于，提供一種人字果藥材中木蘭花堿的含量測定方法。本發明以木蘭花堿為測定指標，采用高效液相色譜法，建立人字果藥材的含量測定方法，為人字果藥材的質量標準研究提供實驗依據；所述測定方法準確，靈敏度高，重復性好，結果可靠，為人字果藥材質量控制和評價提供依據。

為解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案實現：一種人字果藥材中木蘭花堿的含量測定方法，所述木蘭花堿的含量測定方法為：

色譜條件：Pntulips BP-C₁₈柱(4.6mm×250mm，2.5μm)；流動相：流動相A為乙腈，流動相B為0.1％磷酸-0.1％三乙胺水溶液，梯度洗脫；檢測波長：260～280nm；柱溫：20～30℃；流速：0.8～1.2mL·min^-1；進樣量：5～20μL；

對照品溶液的制備：精密稱取木蘭花堿對照品適量，置容量瓶中，加70～80％甲醇溶液配成0.30032～0.50032mg·mL^-1的對照品溶液；

供試品溶液的制備：取人字果藥材粉末0.8～1.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入30～90％甲醇溶液20～50mL，稱定重量，超聲提取，取出，放冷，加相應甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，過濾，取15mL續濾液，用石油醚萃取，至石油醚層無明顯變化后，得下層萃取液，即得供試品溶液；

HPLC法測定：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測定，測得峰面積值并計算含量，即可。

前述的人字果藥材中木蘭花堿的含量測定方法中，梯度洗脫時，梯度洗脫程序為：

0～10min，5％～20％A，10～30min，20％～40％A。

前述的人字果藥材中木蘭花堿的含量測定方法中，所述的超聲提取是：在功率100W，頻率40Hz下超聲提取30～60min。