[發明專利]一種高粱中角鯊烯含量的測定方法

有效

• 申請號: 201810521302.1
• 申請日: 2018-05-28
• 公開（公告）號: CN108663453B
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 倪德讓;楊玉波;胡光源;林琳;王和玉;王莉
• 申請（專利權）人: 貴州茅臺酒股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京市萬慧達律師事務所 11111
• 代理人: 謝敏楠

本發明公開了一種測定高粱中角鯊烯含量的方法，通過粉碎、浸提、萃取，建立了液液微萃取結合氣相色譜?質譜聯用技術(GC?MS)測定高粱中角鯊烯含量的方法。本方法采用NaOH?乙醇?水溶液浸提，能夠減小高粱中油脂的干擾，大幅提高目標物的響應，具有靈敏、快速、準確的優點，從而實現了高粱中角鯊烯含量的準確測定。

技術領域

本發明屬于分析化學研究領域，具體涉及一種高粱中角鯊烯含量的測定方法。

背景技術

角鯊烯是一種具有生物活性的萜類物質，具有提高體內超氧化物歧化酶(SOD)活性、增強機體免疫能力、抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤等多種生理功能。近年來的研究指出通過膳食補充的角鯊烯同樣具有健康功效，同時通過膳食補充角鯊烯的護膚作用也被逐漸證實。

角鯊烯除在鯊魚肝臟中含量較高外，在橄欖油、米糠油等植物油中含量也相對較高，雖然有研究報道了采用索氏提取法對大米中的角鯊烯含量進行測定，但高粱中的角鯊烯含量低，油脂含量高(3～5％)，目前尚未有高粱中角鯊烯的研究。固體樣品中角鯊烯含量的測定一般采用索氏提取法富集脂溶性成分后進行分析，對于脂肪含量高的樣品如植物油等，則需要進一步采用皂化反應消除脂肪酸等的干擾，以提高角鯊烯的儀器響應。這些方法的有機溶劑用量大、反應時間長、操作繁瑣，檢測成本高。

發明內容

為了解決現有技術存在的上述問題，本發明提出一種高粱中角鯊烯含量的測定方法。

本發明的目的在于提供一種簡便、有機溶劑用量小、成本低的高粱中角鯊烯含量的測定方法。

本發明采用乙醇水溶液浸提并加入適量NaOH，利用角鯊烯醇溶性和非皂化的特性，通過液液微萃取使角鯊烯在有機相中得到富集，減小了高粱中油脂的干擾，提高了高粱中角鯊烯的檢出限和準確性。同時，操作步驟簡便、大大減少了有機溶劑的使用量，節省了前處理時間。

具體是通過以下技術方案實現的：

本發明提供了一種測定高粱中角鯊烯含量的方法，是將高粱籽粒經粉碎、浸泡、離心、萃取處理獲得有機相，采用氣相色譜-質譜聯用儀(GC-MS)分析，具體包括以下步驟：

(1)粉碎：

作為優選的實施方式，高粱籽粒除雜后，采用旋風粉碎機進行磨碎。

(2)浸提：

采用NaOH乙醇水溶液作為浸提液浸提粉碎后的樣品，離心獲得上清液備用。

步驟(2)中，所述的浸提液為NaOH乙醇水溶液。在所述的NaOH乙醇水溶液的中，NaOH的濃度為0～0.3mol/L；乙醇的體積分數為0～40％。作為優選的實施方式，NaOH的濃度為0.1～0.25mol/L；乙醇的體積分數為10～20％；作為更優選的實施方式，NaOH的濃度為0.15mol/L；乙醇的體積分數為10％。粉碎樣品與浸提液(NaOH乙醇水溶液)的質量：體積比為1:(5～30)；優選為1：20。作為優選的實施方式，采用振蕩的方式進行浸提。進一步地，浸提時間為5～30min，振蕩的轉數為150～450r/min；優選浸提時間為15min；振蕩的轉數為450r/min。其中，離心轉數為3000～6000r/min，時間為5～30min；作為優選的實施方式，離心轉數為4500r/min，時間為5min。

(3)萃取：

將NaCl、上清液和萃取劑混勻，靜置分層后獲得上層有機相待分析。

步驟(3)中，所述的萃取劑為戊烷、正己烷或乙醚中的至少一種。作為優選的實施方式，所述的萃取劑為乙醚和戊烷的混合物；更優選地，乙醚和戊烷的體積比為1:1。作為優選的實施方式，步驟(3)中，采用旋渦振蕩的方式混勻；進一步地，振蕩時間為1～5min；更優選為1min。萃取劑與上清液的體積比為1:(1～10)；優選為1:5。NaCl與上清液的質量體積比為(1～5):1；優選為3.6：1。