[發(fā)明專利]一種蛋白質(zhì)組裝體及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810506122.6
• 申請日: 2018-05-24
• 公開（公告）號: CN108640980B
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 牛忠偉;高偲嘉;田野
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院理化技術(shù)研究所;中國科學(xué)院大學(xué)
• 主分類號: C07K14/08
• 分類號: C07K14/08
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 白鳳瑩

本發(fā)明公開一種蛋白質(zhì)組裝體及其制備方法。本發(fā)明首先公開一種蛋白質(zhì)組裝體，該組裝體是由氟尾修飾的病毒納米粒子衣殼蛋白自組裝而成的具有囊泡結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)組裝體。本發(fā)明還公開了上述蛋白質(zhì)組裝體的制備方法。本發(fā)明蛋白質(zhì)組裝體利用病毒納米粒子自身的自組裝特性，通過簡便有效的方法實現(xiàn)了蛋白特定位點的修飾，成功制備修飾不同長度氟尾的衣殼蛋白的蛋白質(zhì)組裝體。本發(fā)明蛋白質(zhì)組裝體選擇氟尾來代替聚合物作為驅(qū)動蛋白質(zhì)分子自組裝的鏈段，氟尾不僅具有單分散的分子量和清晰的分子結(jié)構(gòu)，而且可以通過氟氟相互作用形成既疏水又疏油的第三相—氟相。氟尾的引入不會破壞蛋白質(zhì)分子的單分散性，而且可以使組裝體在血液循環(huán)中具有更好的穩(wěn)定性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)用材料領(lǐng)域。更具體地，涉及一種蛋白質(zhì)組裝體及其制備方法。

背景技術(shù)

明確的分子量和清晰的分子結(jié)構(gòu)是生物醫(yī)用材料能否實現(xiàn)應(yīng)用轉(zhuǎn)化的重要因素。受自然啟發(fā)得到的蛋白質(zhì)組裝體不僅具有明確的分子量和清晰的分子結(jié)構(gòu)，而且具有良好的生物相容性。蛋白組裝體在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，如生物傳感、藥物遞送、模擬原始細(xì)胞功能等方面都有重要的意義(例如X.-H.Dong,et al.Three‐Dimensional Ordered AntibodyArrays Through Self‐Assembly of Antibody–Polymer Conjugates[J].Angew.Chem.Int.Ed.2017,56,1273.Ge,J.,et al.Protein–Polymer HybridNanoparticles for Drug Delivery[J].Small,2012，8,3573.)。但是，蛋白質(zhì)本身如牛血清白蛋白通常不具有自組裝的能力。為了賦予蛋白質(zhì)自組裝能力，往往需要在蛋白表面修飾疏水的聚合物，形成兩親性分子。但是，聚合物具有多分散的分子量和不可控的分子結(jié)構(gòu)，它的引入會破壞蛋白質(zhì)本身的分子量單分散性和清晰的分子結(jié)構(gòu)。因此，需要提供一種不僅可以提供強自組裝驅(qū)動力，而且具有單分散分子量和清晰的分子結(jié)構(gòu)的分子來代替聚合物修飾在蛋白質(zhì)表面。

另外，蛋白分子的表面具有許多反應(yīng)位點，普通的化學(xué)修飾往往不能確定蛋白的反應(yīng)位點(例如Xin Huang,et al.Interfacial assembly of protein-polymer nano-conjugates into stimulus-responsive biomimetic protocells[J].Nat.Commun.2013,4,2239.)。通過化學(xué)方法實現(xiàn)蛋白特定位點的修飾往往需要復(fù)雜的步驟。因此，需要尋找一種簡便有效的方法實現(xiàn)蛋白特定位點的修飾。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種蛋白質(zhì)組裝體，該蛋白質(zhì)組裝體利用氟尾代替聚合物為蛋白質(zhì)分子提供了自組裝驅(qū)動力，同時不會破壞蛋白質(zhì)分子的單分散性。

本發(fā)明的另一個目的在于提供一種上述蛋白質(zhì)組裝體的制備方法，該方法利用病毒納米粒子的自組裝特性來實現(xiàn)蛋白質(zhì)特定位點的修飾，簡化了操作步驟。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種蛋白質(zhì)組裝體，該蛋白質(zhì)組裝體是由氟尾修飾的病毒納米粒子衣殼蛋白自組裝而成的具有囊泡結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)組裝體。

進(jìn)一步，所述氟尾為含3-21個氟原子的全氟碳氟鏈，分子式通式為-CH₂(CF₂)_nCF₃。

進(jìn)一步，所述病毒納米粒子衣殼蛋白選自煙草花葉病毒衣殼蛋白、豇豆花葉病毒衣殼蛋白、M13噬菌體衣殼蛋白、T2噬菌體衣殼蛋白中任意一種。

進(jìn)一步，所述蛋白質(zhì)組裝體的尺寸為30-200nm。

本發(fā)明還提供了上述蛋白質(zhì)組裝體的制備方法，包括以下步驟：

1)將病毒納米粒子均勻分散在中性緩沖溶液中，攪拌，形成反應(yīng)溶液一；