[發明專利]一種用于新疆蔥蒜野生近緣種遺傳多樣性分析的TRAP標記引物組合及其應用有效
| 申請號: | 201810505784.1 | 申請日: | 2018-05-24 |
| 公開(公告)號: | CN108796109B | 公開(公告)日: | 2022-03-29 |
| 發明(設計)人: | 林辰壹;王丹丹 | 申請(專利權)人: | 新疆農業大學 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 830052 新疆維吾爾自治區烏魯木齊市*** | 國省代碼: | 新疆;65 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 新疆 野生 近緣 遺傳 多樣性 分析 trap 標記 引物 組合 及其 應用 | ||
1.一種TRAP分子標記,其特征在于,所述的分子標記用于新疆蔥蒜野生近緣種遺傳多樣性分析;所述分子標記的引物組合為FS-F1+FS-R2或FS-F2+FS-R2;
所述FS-F1的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;所述FS-F2的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;所述FS-R2的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。
2.根據權利要求1所述的TRAP分子標記,其特征在于,所述的新疆蔥蒜野生近緣種為阿爾泰蒜、奇臺蒜、多籽蒜、健蒜、新疆蒜、喀納斯蒜、烏魯木齊蒜、棱葉蒜、小山蒜及實葶蔥。
3.一種權利要求1所述的TRAP分子標記用于新疆蔥蒜野生近緣種遺傳多樣性分析的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)提取新疆蔥蒜野生近緣種基因組DNA;
(2)以所述的基因組DNA為模板,使用權利要求1所述的引物組合進行PCR擴增;
(3)根據PCR擴增產物,基于UPGMA法對新疆蔥蒜野生近緣種進行聚類分析。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,步驟(2)中所述PCR擴增的反應體系為:dNTPs濃度為0.250mmol/L、引物濃度為0.250μmol/L、Taq酶用量為0.750U和模板DNA用量為75.000ng;所述反應體系的總體積為20μL。
5.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,進行所述PCR擴增反應時,其PCR反應程序具體為:
94℃預變性3min;94℃變性45s,37℃退火45s,72℃延伸1min,循環5次;94℃變性45s,53.2℃退火45s,72℃延伸1min,循環35次;72℃延伸5min。
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