[發明專利]單環刺螠糖胺聚糖在抗血栓方面的應用

在審

• 申請號: 201810505593.5
• 申請日: 2018-05-24
• 公開（公告）號: CN108836978A
• 公開（公告）日: 2018-11-20
• 發明（設計）人: 袁春營;張旭;趙紫越;崔青曼
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: A61K31/726
• 分類號: A61K31/726;A61P7/02;A61P9/10
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 楊歡

1.一種單環刺螠糖胺聚糖在抗血栓方面的應用，其特征在于，所述的單環刺螠糖胺聚糖采用下述方式制備：

(1)原料處理：將原料單環刺螠洗凈后，勻漿，制成勻漿液；

(2)酶解：向所述勻漿液中加入枯草桿菌中性蛋白酶，在43℃-47℃水浴條件下酶解4-6h，酶解液煮沸滅酶后，5000r-8000r/min離心10min-15min，得上清液；

(3)超濾：將所述上清液通過相對分子質量1萬的中空纖維濾膜超濾分離，得到相對分子質量1萬以下和相對分子質量1萬以上的兩種組分的液體；

(4)糖胺聚糖的制備：

①除蛋白質：將所述相對分子質量1萬以上的組分的液體濃縮至該液體體積的1/3-1/4，先用HCl水溶液調pH至2.0，離心除去沉淀，上清液用NaOH水溶液調pH至7.0，離心除去沉淀，上清液加入三氯乙酸使三氯乙酸的最終質量濃度為3％-5％，離心除去蛋白質沉淀；

②醇沉、洗滌：將步驟①獲得的上清液在攪拌下加入乙醇，使乙醇的體積濃度為70％-80％，于4℃條件下靜置20-28小時，5000r-8000r/min離心10min-15min，移去上清液，沉淀依次用丙酮和無水乙醇洗滌2-4次，得粗提糖胺聚糖；

③陰離子交換柱層析：將粗提糖胺聚糖溶于蒸餾水中，使其質量濃度為1％-3％，加到陰離子交換柱中，先用pH＝5.0-5.5乙酸-乙酸鈉緩沖溶液洗脫，再用0-2mol/L梯度的NaCl水溶液洗脫，洗脫液濃縮至洗脫液體積的1/2-1/4、透析、再濃縮至透析后液體積的1/3-1/4；

④凝膠過濾層析：將步驟③獲得的濃縮液上樣于SephadexG-100凝膠過濾柱，進一步分離純化，收集的流出液濃縮至流出液體積的1/4-1/6，濃縮液冷凍干燥得高純糖胺聚糖。

2.根據權利要求1所述的單環刺螠糖胺聚糖在抗血栓方面的應用，其特征在于，該高純糖胺聚糖用于抗血栓藥物或保健品的使用劑量為200μg-500μg/kg/d。

3.根據權利要求1所述的單環刺螠糖胺聚糖在抗血栓方面的應用，其特征在于，所述的單環刺螠糖胺聚糖可以應用于口服、注射或者外用劑。