[發明專利]一種促進產谷氨酰胺轉胺酶的茂源鏈霉菌快速生長的培養基及其配制方法和應用

有效

• 申請號: 201810502575.1
• 申請日: 2018-05-23
• 公開（公告）號: CN110527658B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 金明飛;高紅亮;田蘇;常忠義;陳璐;張玉如;武世強;陳中山
• 申請（專利權）人: 華東師范大學
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 上海德禾翰通律師事務所 31319
• 代理人: 夏思秋

本發明公開了一種促進產谷氨酰胺轉胺酶的茂源鏈霉菌快速生長的培養基，其組分及質量體積比為：可溶性淀粉16～24g/L、KNO₃0.8～1.2g/L、MgSO₄·7H₂O0.4～0.6g/L、K₂HPO₄·3H₂O?0.4～0.6g/L、NaCl?0.4～0.6g/L、FeSO₄·7H₂O0.008～0.012g/L、堿性氨基酸0.1～2g/L，瓊脂20g/L，pH值6～8。本發明采用產谷氨酰胺轉胺酶的茂源鏈霉菌為實驗菌株，在上述配制的培養基上，培養四天的菌苔的厚實度與不加堿性氨基酸的對照培養基上培養七天的菌苔厚實度差異不明顯。將本發明所述的培養基上生長四天的菌苔進行種子及發酵培養，獲得的谷氨酰胺轉胺酶產量與培養七天的對照組相比無明顯差異。本發明顯著降低了產谷氨酰胺轉胺酶的茂源鏈霉菌的生長時間，大大提高了工業生產效率。

技術領域

本發明屬于微生物育種領域，具體涉及一種促進產谷氨酰胺轉胺酶的茂源鏈霉菌快速生長的培養基及其配制方法和應用。

背景技術

谷氨酰胺轉胺酶(Transglutaminase，簡稱TGase，EC?2.3.2.13)通過催化蛋白質分子內及分子間發生酰基轉移反應，使產品獲得良好的功能性質。谷氨酰胺轉胺酶被FDA批準為“通用安全認證(GRAS)”添加劑，廣泛應用于食品、紡織、醫藥等領域，在動物、植物、微生物中相繼發現了TGase的存在，其中微生物發酵生產的TGase因無需依賴Ca²⁺、具有成本低廉等優勢被應用于工業生產中。

茂源鏈霉菌是工業生產TGase的主要生產菌株，其生產的MTG創造了巨大的商業價值。然而茂源鏈霉菌的生長周期比較長，田淑翠等報道茂源鏈霉菌在高氏一號平板上生長七天后，菌苔才比較厚實，才可用于后續的擴大培養(田淑翠，牛延寧等.中國生物工程雜志，2016(09)：47-53)，最終獲得谷氨酰胺轉胺酶需要9.5天，工業生產中的時間成本較高。

氨基酸作為一種生長因子對微生物的生長及目標產物的積累有著較大影響，很多學者通過在發酵培養基中添加氨基酸，可促進菌體生長及產酶，但至今尚未有添加氨基酸于高氏一號平板中，促進菌體生長以縮短其生長周期的報道。

發明內容

本發明旨在提供一種促進產谷氨酰胺轉胺酶的茂源鏈霉菌快速生長的培養基，縮短茂源鏈霉菌生長時間，以利于工業化生產過程中顯著縮短培養周期，降低生產成本，提高培養效率。

本發明首要解決的技術問題是提供一種促進產谷氨酰胺轉胺酶的茂源鏈霉菌(Streptomyces?mobaraensis)快速生長的培養基以及其制作方法和使用方法。

為解決以上技術問題，本發明提供以下技術方案：本發明提供了一種促進產谷氨酰胺轉胺酶的茂源鏈霉菌快速生長的培養基，其組成成分及質量體積比為：可溶性淀粉16～24g/L、KNO₃0.8～1.2g/L、MgSO₄·7H₂O?0.4～0.6g/L、K₂HPO₄·3H₂O?0.4～0.6g/L、NaCl0.4～0.6g/L、FeSO₄·7H₂O?0.008～0.012g/L、堿性氨基酸0.1～2g/L、瓊脂20g/L，pH值：6～8。

優選地，為可溶性淀粉20g/L、KNO₃1g/L、MgSO₄·7H₂O?0.5g/L、K₂HPO₄·3H₂O?0.5g/L、NaCl?0.5g/L、FeSO₄·7H₂O?0.01g/L、瓊脂20g/L，堿性氨基酸0.1～2g/L，pH值7.4。