[發明專利]一種生物素的檢測方法

有效

• 申請號: 201810497721.6
• 申請日: 2018-05-22
• 公開（公告）號: CN108801961B
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 陳燕;賈洪玉;楊向黎;韓娟;王文杰;王羽;敬佩
• 申請（專利權）人: 山東農業工程學院
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 濟南日新專利代理事務所(普通合伙) 37224
• 代理人: 劉亞寧

本發明公開了一種生物素的檢測方法，包括以下步驟：a.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N?AuCl₄復合物，加入到PBS緩沖溶液中，再加入標準生物素形成不同濃度的標準生物素溶液，混合均勻后加入比色皿中，記錄在267nm波長處的吸光度值，繪制標準曲線；b.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N?AuCl₄復合物，加入到PBS緩沖溶液中，再加入待檢測的生物素樣品，混合均勻后加入比色皿中，記錄267nm波長處的吸光度，通過標準工作曲線，計算得到待檢測的生物素樣品的濃度。本發明的檢測方法，直接利用氯金酸和CTAB的復合物，無需復雜的合成工藝，操作簡單；無需借助親和素或鏈霉親和素等價格昂貴的試劑；不需要昂貴的分析儀器；利用紫外區間的光譜進行分析，避免了因發酵液本身顏色而產生的干擾。

技術領域

本發明涉及一種生物素的檢測方法，尤其涉及一種可快速、準確、靈敏的檢測生物素的方法，屬于生物傳感領域。

背景技術

生物素作為B族類維生素，參與機體的多種新陳代謝活動，被廣泛應用于食品、醫藥、飼料、發酵等領域，對工農業生產和人們的日常生活產生了重要的影響。通過檢測生物素的含量可以對有關生物素的工農業生產加以指導，實現產品的最優化，維護人們的健康。目前，國內外關于生物素的檢測方法主要有微生物法、高效液相色譜法、酶聯免疫分析法、光譜法和電化學法等。然而，微生物法準確度差且整個操作流程費時、費力；高效液相色譜法所需儀器和試劑昂貴且樣品處理過程較為復雜，對研究人員的技術要求較高；基于生物素和親和素特異性結合的酶聯免疫法和光譜法雖然操作簡單、分析速度快且準確度高，但是這類方法所用的試劑親和素或鏈霉親和素市場造價較高，難以在生產上進行推廣應用。因此，研發一種便宜、簡單、快速、準確、靈敏的生物素檢測方法具有重要的意義。

發明內容

針對上述現有技術，本發明提供了一種快速、準確、靈敏且成本低的生物素的檢測方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種生物素的檢測方法，包括以下步驟：

一種生物素的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

a.取0.1～2mL的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復合物，加入到3mL0.01M的PBS緩沖溶液中，再加入標準生物素形成不同濃度的標準生物素溶液，混合均勻后加入比色皿中，記錄不同濃度的標準生物素溶液在267nm波長處的吸光度值，以267nm波長處吸光度A的變化值和生物素的濃度繪制標準曲線；

b.取0.1～2mL的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復合物，加入到3mL0.01M的PBS緩沖溶液中，再加入待檢測的生物素樣品，混合均勻后加入比色皿中，記錄267nm波長處的吸光度，通過標準工作曲線，計算得到待檢測的生物素樣品的濃度。

或者：包括以下步驟：

a.取0.1～2mL的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復合物，加入到3mL0.01M的PBS緩沖溶液中，混合均勻后加入比色皿中，得到500～200nm波長范圍的吸收光譜，作為基線；