[發(fā)明專利]一種生物素的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810497721.6
• 申請日: 2018-05-22
• 公開（公告）號: CN108801961B
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳燕;賈洪玉;楊向黎;韓娟;王文杰;王羽;敬佩
• 申請（專利權(quán)）人: 山東農(nóng)業(yè)工程學(xué)院
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 濟(jì)南日新專利代理事務(wù)所(普通合伙) 37224
• 代理人: 劉亞寧

1.一種生物素的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

a.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復(fù)合物，加入到PBS緩沖溶液中，再加入標(biāo)準(zhǔn)生物素形成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)生物素溶液，混合均勻后加入比色皿中，記錄不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)生物素溶液在267nm波長處的吸光度值，以267nm波長處吸光度A的變化值和生物素的濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

b.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復(fù)合物，加入到PBS緩沖溶液中，再加入待檢測的生物素樣品，混合均勻后加入比色皿中，記錄267nm波長處的吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計(jì)算得到待檢測的生物素樣品的濃度。

2.一種生物素的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

a.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復(fù)合物，加入到PBS緩沖溶液中，混合均勻后加入比色皿中，得到500～200nm波長范圍的吸收光譜，作為基線；

b.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復(fù)合物，加入到PBS緩沖溶液中，再加入標(biāo)準(zhǔn)生物素形成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)生物素溶液，混合均勻后加入比色皿中，得到不同濃度的生物素的吸收光譜；

c.記錄不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)生物素溶液在267nm波長處的吸光度值，以267nm波長處吸光度A的變化值和生物素的濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

d.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復(fù)合物，加入到PBS緩沖溶液中，再加入待檢測的生物素樣品，混合均勻后加入比色皿中，記錄267nm波長處的吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計(jì)算得到待檢測的生物素樣品的濃度。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的生物素的檢測方法，其特征在于：所述的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復(fù)合物，是由氯金酸和陽離子表面活性劑十六烷基三甲基溴化銨反應(yīng)得到的：取10～1000mg的十六烷基三甲基溴化銨，加水50ml，加熱攪拌溶解后，室溫條件下加入濃度為0.01～5mg/L的氯金酸溶液，攪拌0.5～10小時(shí)，即得。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的生物素的檢測方法，其特征在于：所述不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)生物素溶液的濃度范圍在5～400μg/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物素的檢測方法，其特征在于：步驟如下：

a.取0.1～2mL的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復(fù)合物，加入到3mL0.01M的PBS緩沖溶液中，再加入標(biāo)準(zhǔn)生物素形成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)生物素溶液，混合均勻后加入比色皿中，記錄在267nm波長處的吸光度值，以267nm波長處吸光度A的變化值和生物素的濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

b.取0.1～2mL的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄復(fù)合物，加入到3mL0.01M的PBS緩沖溶液中，再加入待檢測的生物素樣品，混合均勻后加入比色皿中，記錄267nm波長處的吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計(jì)算得到待檢測的生物素樣品的濃度。