[發明專利]一種培養CIK細胞的方法在審
| 申請號： | 201810485909.9 | 申請日： | 2018-05-21 |
| 公開（公告）號： | CN108642010A | 公開（公告）日： | 2018-10-12 |
| 發明（設計）人： | 王歡 | 申請（專利權）人： | 王歡 |
| 主分類號： | C12N5/0783 | 分類號： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 214023 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 苦蘵 內酯 烯醇 莪術 顆粒酶B 激活劑 制備 腫瘤細胞 中顆粒 柱層析 激活 發現 | ||
【權利要求書】：
1.一種CIK細胞的培養方法，其特征在于：
取外周抗凝血100mL，加入淋巴細胞分離液，1500rpm離心15min，吸取單個核細胞層，用生理鹽水洗滌3次，每次1500rpm離心10min；最后一次離心后重懸細胞，按細胞數5×106個/mL加含有500μg/L CD3 mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培養基誘導培養成CIK細胞，每隔2～3d半量換液。
誘導培養7天后，用新的含有500μg/L CD3 mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培養基調整細胞數為2×106/ml，并加入顆粒酶B激活劑至終濃度為4-6μM，刺激培養2d后，換成含有500μg/L CD3 mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培養基繼續培養，每隔2～3d半量換液。
所述顆粒酶B激活劑為苦蘵內酯F。
2.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于：外周抗凝血取自健康人或腫瘤患者。
3.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于：顆粒酶B激活劑終濃度為5μM。
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