[發明專利]一種提高CIK細胞殺瘤活性的培養方法在審

申請號：	201810485905.0	申請日：	2018-05-21
公開（公告）號：	CN108642009A	公開（公告）日：	2018-10-12
發明（設計）人：	王歡	申請（專利權）人：	王歡
主分類號：	C12N5/0783	分類號：	C12N5/0783
代理公司：	暫無信息	代理人：	暫無信息
地址：	214023 江蘇省***	國省代碼：	江蘇;32
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摘要：
搜索關鍵詞：	苦蘵內酯烯醇莪術顆粒酶B 激活劑制備腫瘤細胞中顆粒柱層析激活發現
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【權利要求書】：

1.一種CIK細胞的培養方法，其特征在于：

取外周抗凝血100mL，加入淋巴細胞分離液，1500rpm離心15min，吸取單個核細胞層，用生理鹽水洗滌3次，每次1500rpm離心10min；最后一次離心后重懸細胞，按細胞數5×10⁶個/mL加含有500μg/L CD3 mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培養基誘導培養成CIK細胞，每隔2～3d半量換液。

誘導培養7天后，用新的含有500μg/L CD3 mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培養基調整細胞數為2×10⁶/ml，并加入顆粒酶B激活劑至終濃度為4-6μM，刺激培養2d后，換成含有500μg/L CD3 mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培養基繼續培養，每隔2～3d半量換液。

所述顆粒酶B激活劑為苦蘵內酯A。

2.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于：外周抗凝血取自健康人或腫瘤患者。

3.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于：顆粒酶B激活劑終濃度為5μM。

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