[發明專利]蝎子活性蛋白在審
| 申請號: | 201810473979.2 | 申請日: | 2018-05-17 |
| 公開(公告)號: | CN108659111A | 公開(公告)日: | 2018-10-16 |
| 發明(設計)人: | 金韶京 | 申請(專利權)人: | 金華市飛凌生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07K14/435 | 分類號: | C07K14/435;C07K1/34;A61K35/646;A61P35/00;A61P29/00;A61P25/06;A61P7/02 |
| 代理公司: | 北京國翰知識產權代理事務所(普通合伙) 11696 | 代理人: | 衛翠婷 |
| 地址: | 321032 浙江省*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 活性蛋白 粗蛋白溶液 提取液 飽和硫酸銨溶液 葡聚糖凝膠過濾 對羥基肉桂酸 磷酸鈉緩沖液 超微粉碎 離心沉淀 免疫原性 纖維素柱 藥理作用 截留液 莽草酸 濃縮液 上清液 透析液 超濾 粗粉 等量 全蝎 濕法 透析 過敏 蛋白質 備用 浸泡 靜止 溶解 濃縮 | ||
1.蝎子活性蛋白的提取方法,其特征在于:包括以下步驟:
步驟1:向干燥全蝎粗粉中加水、莽草酸和對羥基肉桂酸,浸泡,濕法超微粉碎后離心,上清液即為提取液;
步驟2:調節步驟1得提取液的pH,然后超濾,截留液水洗干凈,濃縮,備用;
步驟3:向步驟2濃縮液中加入飽和硫酸銨溶液,靜止,離心沉淀用等量的磷酸鈉緩沖液充分溶解,透析,透析液即為粗蛋白溶液;
步驟4:將粗蛋白溶液依次用纖維素柱、葡聚糖凝膠過濾純化,冷凍干燥,即得蝎子活性蛋白。
2.根據權利要求1所述的蝎子活性蛋白的提取方法,其特征在于:所述步驟1中莽草酸的濃度為0.02-0.03mg/mL,對羥基肉桂酸的濃度為0.005-0.01mg/mL。
3.根據權利要求1所述的蝎子活性蛋白的提取方法,其特征在于:所述步驟1中全蝎粗粉和水的固液比為1:10-15,浸泡25-35min,粉碎10-20min。
4.根據權利要求1所述的蝎子活性蛋白的提取方法,其特征在于:所述步驟2中超濾的pH為6.5-7.5,壓力為0.25-0.35Mpa,膜分子量為5-6Kda,時間為20-30min。
5.根據權利要求1所述的蝎子活性蛋白的提取方法,其特征在于:所述步驟2中濃縮液的相對濃度為0.9-1.2g/mL。
6.根據權利要求1所述的蝎子活性蛋白的提取方法,其特征在于:所述步驟3中飽和硫酸銨溶液中含有0.13-0.16mM環己基氨基磺酸鈉。
7.根據權利要求1所述的蝎子活性蛋白的提取方法,其特征在于:所述步驟3中飽和硫酸銨溶液加至濃度為65-75%。
8.根據權利要求1所述的蝎子活性蛋白的提取方法,其特征在于:所述步驟3中磷酸鈉緩沖液的濃度為0.008-0.012mol/L、pH為7.0-8.0。
9.權利要求1-8任何一項所述的蝎子活性蛋白的提取方法制備的蝎子活性蛋白。
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