[發明專利]葉酸功能化的鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒、其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201810472017.5 | 申請日： | 2018-05-17 |
| 公開（公告）號： | CN110501208B | 公開（公告）日： | 2023-06-27 |
| 發明（設計）人： | 楊延蓮;鄭望舒;李平;劉長亮;王琛 | 申請（專利權）人： | 國家納米科學中心 |
| 主分類號： | G01N1/40 | 分類號： | G01N1/40;G01N1/38;G01N1/34 |
| 代理公司： | 北京市英智偉誠知識產權代理事務所(普通合伙) 11521 | 代理人： | 劉丹妮 |
| 地址： | 100190 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 葉酸 功能 親和 修飾 磁性 納米 顆粒 制備 方法 應用 | ||
1.一種葉酸功能化的鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述納米顆粒為使用親水性羧基化超順磁性納米顆粒以鏈霉親和素修飾、進而結合生物素標記的偶聯聚乙二醇的葉酸分子制得；
所述制備方法包括以下步驟：
(1)羧基化磁性納米顆粒的制備：將FeCl3·6H2?O溶于乙二醇形成透明溶液后，加入無水乙酸鈉與無水丙烯酸鈉，加熱劇烈攪拌，形成懸浮液后超聲，加熱超聲后的懸濁液制得羧基化磁性納米顆粒；
(2)鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒的制備：將步驟(1)制得的羧基化磁性納米顆粒轉移至緩沖溶液中形成分散體系；將EDC和sulfo-NHS溶解于上述磁性納米顆粒分散體系中對所述羧基化磁性納米顆粒進行活化；洗滌所述活化后的磁性納米顆粒重新分散于鏈霉親和素溶液振蕩反應，制得鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒；
(3)葉酸功能化的鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒的制備：將步驟(2)制得的鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒分散于牛血清蛋白溶液中并生物素標記的偶聯聚乙二醇的葉酸分子共同孵育，制得葉酸功能化的鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述FeCl3·6H2?O的乙二醇溶液濃度為0.05M～0.5M。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述FeCl3·6H2?O的乙二醇溶液濃度為0.1M～0.2M。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述FeCl3·6H2?O的乙二醇溶液濃度為0.125M。
5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述加熱溫度為150～250℃；所述加熱時間為4～10小時。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述加熱溫度為180℃～220℃；所述加熱時間為6～9小時。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述加熱溫度為200℃；所述加熱時間為8小時。
8.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中：
所述緩沖溶液選自以下一種或多種：MES緩沖溶液，PBS緩沖溶液；和/或
所述鏈霉親和素溶液的溶劑為PBS。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中：
所述緩沖溶液為MES緩沖溶液。
10.根據權利要求1至9中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，所述孵育溫度為4℃～37℃；所述孵育時間為1小時～16小時。
11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，所述孵育溫度為4℃～25℃；所述孵育時間為4小時～12小時。
12.根據權利要求11所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，所述孵育溫度為4℃；所述孵育時間為10小時。
13.一種葉酸功能化的鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒，其特征在于，所述磁性納米顆粒通過權利要求1至12中任一項所述的制備方法制得。
14.根據權利要求13所述的磁性納米顆粒或按照權利要求1至12中任一項所述方法制備的納米顆粒在制備用于循環腫瘤細胞捕獲的藥物和/或醫療產品中的應用。
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