[發明專利]利用甜葉菊新品種814011譜星3號制備高RM含量甜菊糖苷的方法

有效

• 申請號: 201810450140.7
• 申請日: 2015-01-23
• 公開（公告）號: CN108522291B
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發明（設計）人: 奧維迪·瑪珂善;李善汪;卜宇成
• 申請（專利權）人: 譜賽科美國公司
• 主分類號: C07H1/08
• 分類號: C07H1/08
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李唐

1.高RM含量甜菊糖苷產品的制備方法，包括：

（a）預處理：將粉碎的 814011譜星3號甜葉菊干葉于水中萃取，制成甜菊糖苷萃取液，萃取液經過絮凝沉淀和板框壓濾兩道工序后，進入下一道工序；

（b）一次吸附及解吸：采用樹脂吸附上述萃取液中甜菊糖苷有效成分，到樹脂出甜時止；用氫氧化鈉稀溶液、鹽酸稀溶液、純水洗樹脂，至流出液pH值達到7時止；用乙醇溶液對樹脂進行分柱解吸，得含糖苷量為78~86%的解吸液，解吸液進入下一道工序；

（c）一次離子交換：解吸液依次通過一次離子交換除雜后，蒸發濃縮，得到含苷量在82~88%的濃縮液，濃縮液進入下一道工序；

（d）二次離子交換：將濃縮液再通過二次離子交換樹脂進行深度除雜，濃縮得到含苷量≥80%的濃縮液，再除菌過濾，濃縮液進入下一道工序；

（e）噴霧干燥：將除菌過濾后的濃縮液噴霧干燥，得到RM/TSG大于0.08，RD/TSG大于0.08，TSG≥80%的甜菊糖苷產品，

其中，步驟（a）中，所述甜葉菊干葉通過甜葉菊變種植物814011譜星3號的愈傷組織再生而獲得，所述甜葉菊變種植物814011譜星3號的愈傷組織由中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏號為CGMCC No.9701。

2.高RM含量甜菊糖苷產品的制備方法，包括：

（a）預處理：將粉碎的814011譜星3號甜葉菊干葉于水中萃取，制成甜菊糖苷萃取液，萃取液經過絮凝沉淀和板框壓濾兩道工序后，進入下一道工序；

（b）一次吸附及解吸：采用樹脂吸附上述萃取液中甜菊糖苷有效成分，到樹脂出甜時止；用氫氧化鈉稀溶液、鹽酸稀溶液、純水洗樹脂，至流出液pH值達到7時止；用乙醇溶液對樹脂進行分柱解吸，得含糖苷量為78~86%的解吸液，解吸液進入下一道工序；

（c）一次離子交換：解吸液依次通過一次離子交換除雜后，蒸發濃縮，得到含苷量在82~88%的濃縮液，濃縮液進入下一道工序；

（d）二次吸附提純：用二次吸附樹脂三柱串聯吸附上述濃縮液除雜，得到含苷量≥95%的甜菊糖苷提純液，提純液進入下一道工序；

（e）二次離子交換：將提純液通過二次離子交換樹脂進行深度除雜，濃縮得到含苷量≥95%的濃縮液，再經過除菌濾膜除菌過濾，濃縮液進入下一道工序；

（f）噴霧干燥：將除菌過濾后的濃縮液噴霧干燥，得到RM/TSG大于0.08，RD/TSG 大于0.08，TSG≥95%的甜菊糖苷產品，

其中，步驟（a）中，所述甜葉菊干葉通過甜葉菊變種植物814011譜星3號的愈傷組織再生而獲得，所述甜葉菊變種植物814011譜星3號的愈傷組織由中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏號為CGMCC No.9701。

3.高RM含量甜菊糖苷產品的制備方法，包括：

（a）預處理：將甜葉菊葉子與50℃軟水按重量比1:15混合，制成甜菊糖苷提取液，經過絮凝沉淀和板框壓濾兩道工序，板框過濾后的濾液進入下一道工序；

（b）一次吸附及解吸：用一次吸附樹脂吸附上述濾液中甜菊糖苷有效成分，用氫氧化鈉溶液、鹽酸溶液處理吸附了甜菊糖苷有效成分的樹脂，純水淋洗樹脂，至流出液pH值達7時止，再用乙醇溶液進行解吸，得到含苷量84.5%的解吸液，解吸液去醇進入下一道工序；

（c）一次離子交換：去醇解吸液依次通過一次離子交換除雜，蒸發濃縮得到含苷量為85.3%的一次濃縮液，濃縮液進入下一道工序；

（d）二次離子交換：將濃縮液通過二次離子交換樹脂進行深度除雜，經過濃縮得到含苷量為85.4%的二次離子交換液，再進行除菌濾芯除菌過濾，無菌液進入下一道工序；

（e）噴霧干燥：將無菌液進行噴霧干燥，得到RM/TSG大于0.08，RD/TSG大于0.08的甜菊糖苷產品，含苷量為85.4%，

其中，步驟（a）中，所述甜葉菊葉子通過甜葉菊變種植物814011譜星3號的愈傷組織再生而獲得，所述甜葉菊變種植物814011譜星3號的愈傷組織由中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏號為CGMCC No.9701。

4.高RM含量甜菊糖苷產品的制備方法，包括：

（a）預處理：將甜葉菊葉子與 70℃軟水按重量比1:20混合，制成甜菊糖苷提取液，經過絮凝沉淀和板框壓濾兩道工序，板框過濾后的濾液進入下一道工序；

（b）一次吸附及解吸：用一次吸附樹脂吸附上述濾液中甜菊糖苷有效成分，用氫氧化鈉溶液、鹽酸溶液處理吸附了甜菊糖苷有效成分的樹脂，再用乙醇溶液進行解吸，得到含苷量82.6%的解吸液，解吸液去醇進入下一道工序；

（c）一次離子交換：去醇解吸液依次通過一次離子交換除雜，蒸發濃縮得到含苷量為85.7%的一次濃縮液，濃縮液進入下一道工序；

（d）二次吸附提純：用二次大孔吸附樹脂三柱串聯吸附上述濃縮液除雜，得到含苷量為96.5%甜菊糖苷提純液，提純液進入下一道工序；

（e）二次離子交換：通過二次離子交換樹脂進行深度除雜，經過濃縮得到含苷量為96.9%的二次離子交換液，再進行除菌濾芯除菌過濾，無菌液進入下一道工序；

（f）噴霧干燥：將無菌液進行噴霧干燥，得到甜菊糖苷產品，產品 RM/TSG大于0.08，RD/TSG大于0.08，含苷量為97.07%，

其中，步驟（a）中，所述甜葉菊葉子通過甜葉菊變種植物814011譜星3號的愈傷組織再生而獲得，所述甜葉菊變種植物814011譜星3號的愈傷組織由中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏號為CGMCC No.9701。