[發明專利]納米金籠復合物及其在制備檢測人尿液或血液中的cMyBP-C的試劑盒中的應用

有效

• 申請號: 201810449820.7
• 申請日: 2018-05-11
• 公開（公告）號: CN108918857B
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 張寄南;張雷
• 申請（專利權）人: 南京博天科智生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/532
• 分類號: G01N33/532;G01N33/558;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/58;B82Y30/00;B82Y15/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王艷

1.一種納米金籠復合物，其特征在于，所述納米金籠復合物是通過中空正方體金納米粒子與特定單鏈DNA以及顯色抗體鼠抗人cMyBP-C抗體BT09相連接而成的復合物，所述特定單鏈DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2 或SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示，納米金籠標記物包含有顯色抗體鼠抗人cMyBP-C抗體BT09，所述特定單鏈DNA長度為30-80bp，特定單鏈DNA 3'端標有生物素，特定單鏈DNA5’端連有巰基，所述納米金籠復合物的尺寸為10-16 nm和40-60 nm；

所述的納米金籠復合物的制備方法，包括以下步驟：

1）納米金籠溶液的制備：用去離子水制備HAuCl₄溶液，在室溫下用注射泵在HAuCl₄溶液中逐滴加入檸檬酸，之后在繼續攪拌的情況下，待顏色變為紅色后離心去除上清，獲得不同尺寸的中空正方體金納米晶體，然后用去離子水重懸中空正方體金納米晶體，離心除過多的Au³⁺ 離子，去離子水重懸沉淀，加入5~20mg/ml的PVP單體及0.1% Tween得到納米金籠溶液；

2）用0.1 M K₂CO₃調節納米金籠溶液 pH8.5-9.0；將特定單鏈DNA與納米金籠溶液聯接反應6-8小時，加進PVP單體使其終濃度為0.2-1.0%，用2 M NaCl，20 mM phosphate調節pH至7.4得到納米金標記復合物；

3）納米金籠復合物的制備：用K₂CO₃調節納米金標記復合物至pH為7.4-9.0，于納米金標記復合物中逐滴加入顯色抗體鼠抗人cMyBP-C抗體BT09得到納米金籠復合物。

2.權利要求1所述的納米金籠復合物在制備檢測人尿液或血液中的cMyBP-C試劑盒中的應用。

3.一種心臟肌球蛋白結合蛋白C檢測試紙條，其特征在于，所述檢測試紙條上設有權利要求1所述的納米金籠復合物。

4.權利要求3所述的心臟肌球蛋白結合蛋白C檢測試紙條的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）納米金籠復合物的制備：按照權利要求1所述的方法制備得到納米金籠復合物；

2）納米材料墊制備及噴墊：將納米金籠復合物噴印在納米材料墊上；

3）檢測線制備：將單克隆抗體BT10劃在醋酸纖維膜上，制成檢測線；

4）質控線制備：將羊抗鼠IgG抗體劃在醋酸纖維膜上，制成質控線；

5）試紙條裝配；

6）檢測。