[發明專利]一種BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器的制備方法和用途

有效

• 申請號: 201810448456.2
• 申請日: 2018-05-11
• 公開（公告）號: CN108896750B
• 公開（公告）日: 2021-05-25
• 發明（設計）人: 孫見凡;王曉艷;劉振江;胡文杰;杜道林
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于分析化學領域，提供了一種BSA?Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器的制備方法和用途。該發明包括(1)制備BSA?Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器；(2)尿酸酶催化尿酸生成H₂O₂；(3)用BSA?Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器檢測H₂O₂，從而檢測尿酸含量。與現有技術相比，BSA?Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器不僅具有熒光傳感器時間短，操作簡單，無需處理前期樣品，無毒性，成本低等優點，還較于單熒光傳感器有更高的靈敏度和準確度。血清中尿酸水平與人體疾病息息相關，發明一種比例型熒光傳感器檢測尿酸具有重要的意義。

技術領域

本發明屬于分析化學領域，涉及一種BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器的制備方法和用途。

背景技術

尿酸(2，6，8-三羥基嘌呤)是人體核蛋白和核酸中嘌呤分解代謝的最終產物。當機體出現代謝紊亂時，會引起嘌呤過量，嘌呤代謝產生的尿酸也相應增加。一般來說，尿酸水平過高會引起人類的相關疾病，例如痛風，腎臟疾病和心血管疾病等。因此，在臨床診斷領域中分析尿酸來早期診斷嘌呤代謝疾病是非常必要的。

迄今為止，人血清中尿酸的檢測工具很多，如酶法，尿酸傳感器，電化學法，高性能液相色譜等。與以前報道的檢測尿酸的方法相比，基于金屬納米材料的熒光傳感器具有檢測時間短，操作簡單，無需處理以往樣品，無毒性，成本低等優點。然而，這種基于金屬納米材料檢測策略常采用單熒光測試，易受樣品的環境條件和光檢測器的漂移等因素的影響，這限制了檢測的靈敏度和準確度。幸運的是，因為比例型熒光傳感器允許在兩個不同的波長下同時測量熒光強度，可以有效避免背景熒光的潛在干擾，所以它的檢測靈敏度更高和準確性更強。目前，使用比例型熒光檢測方案的報道已經有很多。因此，比例型熒光傳感器策略的發展具有重要的意義，而且通過比例型熒光傳感器對血清中尿酸的檢測并無報道。

發明內容：

本發明的目的是建立一種BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器，并用于檢測血清中的尿酸。

一種BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器的制備方法，包括如下步驟：

(1)制備牛血清蛋白--金銀合金納米簇(BSA-Au/Ag NCs)水溶液：

將4mL的氯金酸(10mM)和1mL的硝酸銀(10mM)混合(金銀摩爾比為4:1)，加入到5mL的牛血清蛋白溶液(0.75mM)中，強有力攪拌混合5分鐘后，用氫氧化鈉調節溶液的酸堿度，然后置于37℃的恒溫油浴鍋反應12小時，反應結束后用超純水透析純化48小時，得到牛血清蛋白--金銀合金納米簇水溶液；

牛血清蛋白為保護劑和還原劑。

(2)建立BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器：

將步驟(1)得到的BSA-Au/Ag NCs水溶液、OPD、HRP加入到稀釋液磷酸鹽緩沖液中，得到BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器。

步驟(2)中，所述BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器中，BSA-Au/Ag NCs的濃度為20nM，OPD的濃度為50～300μM；HRP的濃度為10ng/mL；所用磷酸鹽緩沖液濃度為10mM，pH＝6.0。

HRP為催化OPD的酶。

將本發明制備的BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器用于檢測尿酸的用途，具體檢測方法，包括如下步驟：

(1)尿酸酶催化尿酸生成H₂O₂；