[發明專利]一種BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器的制備方法和用途

有效

• 申請號: 201810448456.2
• 申請日: 2018-05-11
• 公開（公告）號: CN108896750B
• 公開（公告）日: 2021-05-25
• 發明（設計）人: 孫見凡;王曉艷;劉振江;胡文杰;杜道林
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)制備牛血清蛋白--金銀合金納米簇BSA-Au/Ag NCs水溶液，備用；

將4mL的氯金酸溶液和1mL的硝酸銀溶液混合，加入到5mL的牛血清蛋白溶液中，強有力攪拌混合5分鐘后，用氫氧化鈉調節溶液的酸堿度，然后置于37℃的恒溫油浴鍋反應12小時，反應結束后用超純水透析純化48小時，得到牛血清蛋白--金銀合金納米簇水溶液；

氯金酸溶液的濃度為10mM，硝酸銀溶液的濃度為10mM，牛血清蛋白溶液的濃度為0.75mM，金銀的摩爾比為4:1；

(2)建立BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器：將步驟(1)得到的BSA-Au/Ag NCs水溶液、OPD、HRP加入到稀釋液磷酸鹽緩沖液中，得到BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器；

其中，所述BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器中，BSA-Au/Ag NCs的濃度為20nM，OPD的濃度為50～300μM；HRP的濃度為10ng/mL。

2.如權利要求1所述的一種BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所用磷酸鹽緩沖液濃度為10mM，pH＝6.0。

3.將權利要求1所述制備方法制得的BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器用于檢測尿酸的用途。

4.如權利要求3所述的用途，其特征在于，利用BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器檢測尿酸的方法，包括如下步驟：

(1)尿酸酶催化尿酸生成H₂O₂；

(2)將步驟(1)制得的H₂O₂加入BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器中，反應溫度為25～50℃，時間為10～60分鐘；檢測其熒光強度，580nm處熒光強度為I₅₈₀，690nm處熒光強度為I₆₉₀，得出I₅₈₀/I₆₉₀；

(3)配置一系列不同濃度的尿酸，經尿酸酶催化后，加入BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型熒光傳感器中，反應完全后檢測產物熒光，根據不同濃度的尿酸對應的熒光信號強度得到一系列的I₅₈₀/I₆₉₀，建立標準曲線。

5.如權利要求4所述的用途，其特征在于，步驟(1)中，催化pH為4～8；催化時間為10～60分鐘；催化溫度為25～50℃；尿酸酶含量為5～200μg/mL。