[發明專利]一種通過高效液相色譜測定綠原酸的方法

在審

• 申請號: 201810436040.9
• 申請日: 2018-05-09
• 公開（公告）號: CN108459110A
• 公開（公告）日: 2018-08-28
• 發明（設計）人: 黃瑛;李永強;陳超;溫霖;李穎;李愛民
• 申請（專利權）人: 國珍健康科技（北京）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

本發明涉及一種通過高效液相色譜法測定綠原酸含量的方法，包括如下步驟：1)采用體積分數為48～52％的甲醇的水溶液從含有綠原酸的待測樣中提取得到綠原酸，得待測液；2)將所述待測液通入高效液相色譜儀，采用反相C18色譜柱，以體積比為12～17：83～88的甲醇與0.4％的磷酸為流動相進行檢測。本發明通過優化高效液相色譜法的條件，在測定金銀花提取物中綠原酸的含量時，具有良好的專屬性，靈敏度高，回收率在92.98～117.28％％之間。

技術領域

本發明涉及中藥有效成分的分析領域，具體涉及一種通過高效液相色譜法測定金銀花中綠原酸含量的方法。

背景技術

金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或帶初開的花，金銀花具有清熱解毒，疏散風熱的功效，為臨床常用中藥材。近年來，臨床對金銀花的需求量更是逐年增加。但由于受種植地域環境的影響以及采摘時間、加工方式以及儲存條件的影響導致金銀花藥材的質量參差不齊。

綠原酸是金銀花的主要抗菌、抗病毒有效藥理成分之一。綠原酸也是一種重要的生物活性物質，增高白血球、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基和興奮中樞神經系統等作用。但在體內能被蛋白質滅活，與咖啡酸相似，口服或腹腔注射時，可提高大鼠的中樞興奮性?？稍黾哟笫蠹靶∈蟮男∧c蠕動和大鼠子宮的張力。有利膽作用，能增進大鼠的膽汁分泌。因此可通過檢測金銀花中綠原酸的含量來判斷綠原酸的質量。

發明內容

本發明的目的是提供一種通過高效液相色譜測定金銀花中綠原酸含量的方法，包括如下步驟：

1)采用體積分數為48～52％的甲醇的水溶液從含有綠原酸的待測樣中提取得到綠原酸，得待測液；

2)將所述待測液通入高效液相色譜儀，采用反相C18色譜柱，以體積比為12～17∶83～88的甲醇與0.4％的磷酸為流動相進行檢測。

優選的，所述步驟1)中采用體積分數為50％的甲醇的水溶液提取綠原酸。

優選的，所述步驟2)中，以體積比為15∶85的甲醇與0.4％的磷酸為流動相進行檢測。

優選的，所述待測樣為金銀花粉末。

進一步優選的，所述金銀花粉末的直徑小于50目。

優選的，所述待測金銀花的提取物在所述甲醇的水溶液中的質量濃度為1.5～2.5mg/mL。

進一步優選的，所述步驟1)具體為：

將待測金銀花提取物與甲醇的水溶液混合，在功率400～600W的超聲條件下處理25～35min，然后渦旋混勻，離心，取上清液，重復上述操作至少一次，并將多次得到的上清液混合后過0.45μm的濾膜，即得所述待測液。

優選的，所述步驟2)中控制流速為0.8～1.2mL·min^-1，優選為1.0mL·min^-1；

進一步優選的，柱溫為33～37℃，優選為35℃。

優選的，所述步驟2)中檢測器為VWD檢測器，檢測波長為327nm；

進一步優選的，進樣量為20μL。

作為優選的方案，本發明的方法包括如下步驟：

1)取待測金銀花粉末，然后用體積分數為50％的甲醇溶液將所述待測金銀花提取物溶解，使其濃度為0.4mg/mL，在功率400～600W的超聲條件下處理30min，然后渦旋混勻，離心，取上清液，重復上述操作至少一次，并將兩次得到的上清液混合后過0.45μm的濾膜，得待測液；