[發明專利]一種通過高效液相色譜測定綠原酸的方法

在審

• 申請號: 201810436040.9
• 申請日: 2018-05-09
• 公開（公告）號: CN108459110A
• 公開（公告）日: 2018-08-28
• 發明（設計）人: 黃瑛;李永強;陳超;溫霖;李穎;李愛民
• 申請（專利權）人: 國珍健康科技（北京）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

1.一種通過高效液相色譜測定綠原酸的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)采用體積分數為48～52％的甲醇的水溶液從含有綠原酸的待測樣中提取得到綠原酸，得待測液；

2)將所述待測液通入高效液相色譜儀，采用反相C18色譜柱，以體積比為12～17∶83～88的甲醇與0.4％的磷酸為流動相進行檢測。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟1)中采用體積分數為50％的甲醇的水溶液提取綠原酸。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中，以體積比為15∶85的甲醇與0.4％的磷酸為流動相進行檢測。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述待測樣為金銀花粉末。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述金銀花粉末的直徑小于50目。

6.根據權利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述待測樣在所述甲醇的水溶液中的質量濃度為1.5～2.5mg/mL。

7.根據權利要求1～6任意一項所述的方法，其特征在于，所述步驟1)具體為：

將待測金銀花粉末與甲醇的水溶液混合，在功率400～600W的超聲條件下處理25～35min，然后渦旋混勻，離心，取上清液，重復上述操作至少一次，并將多次得到的上清液混合后過0.45μm的濾膜，即得所述待測液。

8.根據權利要求1或6所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中控制流速為0.8～1.2mL·min^-1，優選為1.0mL·min^-1；

和/或，柱溫為33～37℃，優選為35℃。

9.根據權利要求1～7任意一項所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中檢測器為VWD檢測器，檢測波長為327nm；

和/或，進樣量為20μL。

10.根據權利要求1～9任一項所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)取綠原酸準品，以甲醇為溶劑，按照濃度梯度配制多份標準品溶液；

(2)將所述多份標準品溶液分別上樣于高效液相色譜，采用C18色譜柱，以體積比為15∶85的甲醇與0.4％的磷酸為流動相進行洗脫，得各份標準品溶液對應的色譜圖；

(3)以各份標準品溶液的濃度為橫坐標、以對應色譜圖中綠原酸色譜峰的峰面積為縱坐標作圖，得線性回歸方程；

(4)將粒徑小于50目的待測金銀花粉末與體積分數為50％的甲醇的水溶液混合，使得待測金銀花在所述甲醇的水溶液中的質量濃度為1.5～2.5mg/mL，在功率400～600W的超聲條件下處理25～35min，然后渦旋混勻，離心，取上清液，重復上述操作至少一次，并將多次得到的上清液混合后過0.45μm的濾膜，即得待測液，將所述待測液進樣于高效液相色譜柱中，采用與步驟(2)相同的方法進行檢測，得到待測樣品的色譜圖，將其中綠原酸色譜峰的峰面積帶入步驟(3)所述線性回歸方程中，求得待測樣品中綠原酸的含量。