[發明專利]一種青天葵球莖組織培養快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201810431828.0
• 申請日: 2018-05-08
• 公開（公告）號: CN108522286A
• 公開（公告）日: 2018-09-14
• 發明（設計）人: 袁萍
• 申請（專利權）人: 佛山市元諾科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種青天葵球莖組織培養快速繁殖方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)外植體的取材與消毒：青天葵球莖作為外植體進行消毒，首先將3-5滴洗潔精滴入裝有50ml自來水的燒杯中，把外植體放入燒杯輕輕攪拌5min，再用棉花清洗外植體表面污垢，自來水輕微流水沖洗20-30min；移置超凈工作臺，用75v/v％乙醇浸泡30s，無菌水沖洗一遍，然后再用添加了1-2滴吐溫-20的50ml濃度為0.1v/v％升汞消毒1-2min、無菌水沖洗3-5次，獲得無菌外植體，其中無菌水為經高高溫壓滅菌的蒸餾水；

(2)無菌根狀莖的獲取：將消毒好的外植體置于誘導培養基中進行不定芽誘導，發芽得到無菌根狀莖，所述誘導培養基是以1/2MS為基本培養基，添加5g·L^-1瓊脂，20g·L-1蔗糖，1.5mg·L-1的6-芐基腺嘌呤，0.3mg·L-1的萘乙酸，培養基pH值為6.8，培養條件為：溫度為25-27℃，光照強度1500-2000lux，光照時間為10-12h/d，培養時間為15-20d；

(3)根狀莖繁殖及球莖誘導一體化培養：切取2-3cm的無菌根狀莖置于添加5g·L-1瓊脂，25g·L-1蔗糖，1.0-2.0mg·L-1的6-芐基腺嘌呤、0.1-0.5mg·L-1的激動素(KT)、0.1-0.5mg·L-1的萘乙酸、蘋果汁100-200g·L-1的1/2MS培養基中培養獲得球莖，培養基pH值為6.8，培養條件為：溫度為25-27℃，光照強度1500-2000lux，光照時間為10-12h/d，培養時間為20d；

(4)球莖煉苗移栽：球莖進行煉苗后移植于基質中培養，再移栽至大田。

2.根據權利要求1所述的青天葵球莖組織培養快速繁殖方法，其特征在于：所述基質為按優質塘泥：黃沙＝2：1的比例混合。