[發明專利]檢測萵苣花葉病毒的成套試劑

在審

• 申請號: 201810430265.3
• 申請日: 2018-05-08
• 公開（公告）號: CN108624715A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發明（設計）人: 張永江;向均
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;魏少偉

1.檢測或輔助檢測萵苣花葉病毒的成套試劑，由名稱為P1的引物對和名稱為A1的DNA組成；

所述P1由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA組成；

所述A1為含有所述P1的識別序列的DNA。

2.根據權利要求1所述的成套試劑，其特征在于：所述A1為a1)或a2)：

a1)含有序列表中序列3所示DNA片段的DNA；

a2)序列表中序列3所示的DNA片段。

3.檢測或輔助檢測萵苣花葉病毒的引物對，為權利要求1中所述P1。

4.檢測或輔助檢測萵苣花葉病毒的系統，包括權利要求1所述的成套試劑或權利要求3所述引物對。

5.根據權利要求4所述的系統，其特征在于：所述系統還包括進行重組酶聚合酶擴增所需的其他試劑和/或儀器。

6.檢測萵苣花葉病毒的方法，包括X1)或X2)：

X1)利用權利要求1所述成套試劑對待測樣本的基因組RNA進行重組酶聚合酶擴增，得到擴增產物；若所述擴增產物含有272bp的DNA片段和所述A1的DNA片段，則所述待測樣本含有或候選含有萵苣花葉病毒或所述待測樣本為或候選為萵苣花葉病毒；若所述擴增產物含有所述A1的DNA片段，不含有272bp的DNA片段，則所述待測樣本不含或候選不含萵苣花葉病毒或所述待測樣本不為或候選不為萵苣花葉病毒；若所述擴增產物不含所述A1的DNA片段和272bp的DNA片段或含有272bp的DNA片段不含有所述A1的DNA片段，則擴增反應無效，需重新檢測；

X2)利用權利要求2所述成套試劑對待測樣本的基因組RNA進行重組酶聚合酶擴增，得到擴增產物；若所述擴增產物含有272bp和428bp的DNA片段，則所述待測樣本含有或候選含有萵苣花葉病毒或所述待測樣本為或候選為萵苣花葉病毒；若所述擴增產物含有428bp的DNA片段，不含有272bp的DNA片段，則所述待測樣本不含或候選不含萵苣花葉病毒或所述待測樣本不為或候選不為萵苣花葉病毒；若所述擴增產物不含428bp和272bp的DNA片段或含有272bp的DNA片段不含有428bp的DNA片段，則擴增反應無效，需重新檢測。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：所述重組酶聚合酶擴增的溫度為40℃，和/或，所述重組酶聚合酶擴增的時間為40分鐘。

8.根據權利要求6或7所述的方法，其特征在于：所述重組酶聚合酶擴增的反應體系中，所述P1的兩條單鏈DNA的濃度均為0.4μmol/L，所述A1的濃度為0.4ng/μL。

9.權利要求1所述成套試劑或權利要求2所述引物對的下述任一應用：

X1)在檢測或輔助檢測萵苣花葉病毒中的應用；

X2)在制備檢測或輔助檢測萵苣花葉病毒中的應用。

10.權利要求3-5中任一所述系統在檢測或輔助檢測萵苣花葉病毒中的應用。