[發明專利]一種柑橘黃龍病菌的巢式PCR檢測方法在審
| 申請號： | 201810429977.3 | 申請日： | 2018-05-08 |
| 公開（公告）號： | CN108611430A | 公開（公告）日： | 2018-10-02 |
| 發明（設計）人： | 洪艷云;易圖永;羅永陽;戴良英;譚小平 | 申請（專利權）人： | 湖南農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京知本村知識產權代理事務所 11039 | 代理人： | 劉江良 |
| 地址： | 410128 *** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 柑橘 病菌 巢式PCR 檢測 合成酶 外膜蛋白基因 特異性引物 高度保守 基因片段 檢測技術 克隆測序 快速精準 擴增產物 兩對引物 外膜蛋白 在線比對 對引物 基因 覆蓋 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種柑橘黃龍病菌的巢式PCR精準檢測方法，其特征在于：該方法是以兩對柑橘黃龍病菌特異性引物對待測樣品進行巢式PCR擴增，最后電泳鑒定；該特異性引物為：
第一對引物為F3/B3:正向引物：5’-GGTTATGCTGCCGTTAAAGTGTC-3’
反向引物: 5’-AACCAGCCCTTTCAGGAACAAG-3’
第二對引物為F1/B1:正向引物：5’-TCTGAGGGTGAGCGTAAAACAACTG-3’
反向引物: 5’-TTGGGAAATAGAATGGCTGCTGAAT-3’。
2.如權利要求1所述的柑橘黃龍病菌的巢式PCR檢測方法，其特征在于：
PCR反應體系各主要成分及用量
組分 初始濃度 用量 2+)]]> 10× 2.0μl dNTPs 10mmol/L 1.6μl 正向引物 12.5pmol/μl 0.4μl 反向引物 12.5pmol/μl 0.4μl TaqDNA酶 5U/μl 0.4μl DNA模板 50ng/μl 1.0μl 2O]]> 14.2μl
。
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