[發明專利]一種采用氯化膽堿和乙二醇制作的深度共熔溶劑提取辣木籽多糖的方法

在審

• 申請號: 201810429947.2
• 申請日: 2018-05-08
• 公開（公告）號: CN108752489A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發明（設計）人: 陳慧英;袁黎嬌;李貽靜;張亮微
• 申請（專利權）人: 桂林理工大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了采用氯化膽堿和乙二醇制作的深度共熔溶劑提取辣木籽多糖的方法，包括深度共熔溶劑的制備，辣木籽的預處理，辣木籽多糖的提取，辣木籽多糖的粗純化，總多糖含量的測定，蛋白含量的測定，DEAE?52柱層析純化，得到多糖樣品。本發明具有可操作性強，工藝簡便，成本低，易獲取，總多糖的提取率高等優點。同時，深度共熔溶劑制作簡單，起始物質可再生、可降解，廣泛存在于自然界。

技術領域

本發明涉及一種辣木籽多糖制備方法，具體涉及一種由氯化膽堿和丙三醇制作的深度共熔溶劑提取辣木籽多糖的方法，屬于高效生物質資源提取技術領域。

背景技術

辣木(Moringa oleifera)又名鼓槌樹、洋椿樹，屬百花菜目辣木科，因其根莖有辛辣味，故得名辣木。它是一種多年生熱帶喬木，主要分布于印度、非洲、南美以及東南亞國家，在我國主要分布于臺灣、廣東、云南等地區。辣木籽中含有許多營養成分和活性物質，且具有多種生理活性，在保健品和醫藥行業具有廣泛的用途及開發前景。

多糖是一種高分子的聚合物，由成千上萬個單糖通過糖苷鍵連接而成。多糖廣泛分布于自然界，植物、動物、微生物體內均有存在。天然多糖可用于臨床試驗，如抗糖尿病、抗腫瘤、降血脂等病癥的治療或者作為抗炎、抗病毒的藥物，多糖對于維持人體正常運行具有重要的作用。辣木籽多糖為天然產物，無毒無害，具有很高的研究價值。

深度共熔溶劑(Deep Eutectic Solvents,DES)是一種由氫鍵受體和氫鍵供體形成的分子復合物，是一種鹽溶液。氫鍵受體將兩種化合物通常采用季銨鹽，如便宜可得、易降解、無毒的氯化膽堿，而氫鍵受體則可選擇尿素、乙二醇、丙三醇、草酸等。在將兩種化合物混合過程中由于陰離子和氫鍵供體之間形成的氫鍵引發電荷的離域，導致深度共熔溶劑的熔點低于各組分化合物的熔點。例如常溫下將氯化膽堿和尿素以1：2的摩爾比混合，所得的深度共熔溶劑的熔點大約為12℃，而氯化膽堿的熔點為302-305℃，尿素的熔點為132.7℃，遠遠低于各個組份的熔點。深度共熔溶劑相較于其他離子液體具有價格低廉，容易獲取等優點。

運用深度共熔溶劑提取辣木籽多糖比傳統的提取方法提取效率更高且操作方便，能夠更大限度的獲得辣木籽多糖，提高辣木籽的利用率。

發明內容

本發明的目的是提供一種采用氯化膽堿和乙二醇制作的深度共熔溶劑提取辣木籽多糖的方法，該提取方法提取率高，成本低，能耗低，環保，操作簡單，制備的多糖經過純化，純度提高，是一種優良的提取方法。原技術方案如下：

一種采用氯化膽堿和乙二醇制作的深度共熔溶劑提取辣木籽多糖的方法，包括以下步驟：

(1)深度共熔溶劑的制備：將置于真空干燥箱中干燥后的氯化膽堿和乙二醇以1:2的摩爾比混合，室溫研磨直至得到均一穩定的液體，即深度共熔溶劑；

(2)原材料的處理：選取完好的辣木籽，去殼，50-70℃條件下干燥2-3d后粉碎過60目篩，得到辣木籽細粉；

(3)辣木籽多糖的提取：準確稱取10g步驟(2)辣木籽細粉與100mL步驟(1)深度共熔溶劑混合，置于50-70℃恒溫水域鍋、240r/min轉速下磁子攪拌20-40min，混合物使用高速冷凍離心機12000r/min下離心10-15min分離固體顆粒，取上清液備用；

(4)辣木籽多糖的脫蛋白：取步驟(3)制得的上清液置于冰水中加入3％-5％TCA攪拌10-15min后4℃冰箱靜置4-5h，NaOH調pH至中性，重復操作2次得到除去蛋白質的辣木籽多糖上清液；

(5)辣木籽多糖醇沉：取步驟(4)制得的除蛋白的辣木籽多糖上清液加入4倍體積85％的乙醇，4℃下靜置過夜，取上清液；

(6)濃縮干燥：收集步驟(5)制得的上清液真空濃縮至原來的1/5-1/7，濃縮液冷凍干燥12-24h得到辣木籽粗多糖；