[發明專利]一種采用氯化膽堿和乙二醇制作的深度共熔溶劑提取辣木籽多糖的方法在審
| 申請號： | 201810429947.2 | 申請日： | 2018-05-08 |
| 公開（公告）號： | CN108752489A | 公開（公告）日： | 2018-11-06 |
| 發明（設計）人： | 陳慧英;袁黎嬌;李貽靜;張亮微 | 申請（專利權）人： | 桂林理工大學 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00 |
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| 地址： | 541004 廣*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 辣木籽 共熔 氯化膽堿 溶劑提取 乙二醇 總多糖 溶劑 制作 預處理 多糖樣品 起始物質 可降解 柱層析 制備 蛋白 再生 | ||
1.一種采用氯化膽堿和乙二醇制作的深度共熔溶劑提取辣木籽多糖的方法，其特征包括以下步驟：
(1)深度共熔溶劑的制備：將置于真空干燥箱中干燥后的氯化膽堿和乙二醇以1:2的摩爾比混合，室溫研磨直至得到均一穩定的液體，即深度共熔溶劑；
(2)原材料的處理：選取完好的辣木籽，去殼，50-70℃條件下干燥2-3d后粉碎過60目篩，得到辣木籽細粉；
(3)辣木籽多糖的提取：準確稱取10g步驟(2)辣木籽細粉與100mL步驟(1)深度共熔溶劑混合，置于50-70℃恒溫水域鍋、240r/min轉速下磁子攪拌20-40min，混合物使用高速冷凍離心機12000r/min下離心10-15min分離固體顆粒，取上清液備用；
(4)辣木籽多糖的脫蛋白：取步驟(3)制得的上清液置于冰水中加入3％-5％TCA攪拌10-15min后4℃冰箱靜置4-5h，NaOH調pH至中性，重復操作2次得到除去蛋白質的辣木籽多糖上清液；
(5)辣木籽多糖醇沉：取步驟(4)制得的除蛋白的辣木籽多糖上清液加入4倍體積85％的乙醇，4℃下靜置過夜，取上清液；
(6)濃縮干燥：收集步驟(5)制得的上清液真空濃縮至原來的1/5-1/7，濃縮液冷凍干燥12-24h得到辣木籽粗多糖；
(7)總多糖含量的測定：對步驟(6)制得的辣木籽粗多糖采用考馬斯亮藍法測定；
(8)蛋白含量的測定：再對步驟(7)的辣木籽粗多糖采用苯酚-硫酸法測定；
(9)DEAE-52柱層析純化：將步驟(8)的辣木籽粗多糖配置成10mg/mL的溶液過DEAE-52柱，用0-0.5mol/L NaCl溶液進行洗脫，收集洗脫液進行濃縮干燥，即得到辣木籽多糖。
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