[發明專利]FGF-21類似物的制備及在血栓治療中的應用

有效

• 申請號: 201810427139.2
• 申請日: 2018-05-07
• 公開（公告）號: CN108404119B
• 公開（公告）日: 2020-09-25
• 發明（設計）人: 李德山;李帥;孫旭;王文飛;任桂萍
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣瑞翱生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: A61K38/18
• 分類號: A61K38/18;A61P7/02;A61P29/00;C07K14/50;C12N15/70
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;張立娜

1.成纖維細胞生長因子-21類似物在制備用于治療和/或預防血栓的產品中的應用；

所述成纖維細胞生長因子-21類似物為由成纖維細胞生長因子-21和類彈性蛋白融合而成的融合蛋白；

所述類彈性蛋白為氨基酸序列為SEQ ID No.1的第184-283位所示的蛋白質；

所述成纖維細胞生長因子-21為氨基酸序列為SEQ ID No.1的第1-183位所示的蛋白質。

2.成纖維細胞生長因子-21類似物在如下任一中的應用：

（a）制備用于抑制血栓發生的產品；

（b）制備用于抑制血栓程度的產品；

（c）制備用于降低血漿中纖維蛋白原水平的產品；

（d）制備用于降低血液中紅細胞數和/或血小板數的產品；

（e）制備用于抑制炎癥反應的產品；

（f）制備用于增強溶纖能力的產品；

所述成纖維細胞生長因子-21類似物為由成纖維細胞生長因子-21和類彈性蛋白融合而成的融合蛋白；

所述類彈性蛋白為氨基酸序列為SEQ ID No.1的第184-283位所示的蛋白質；

所述成纖維細胞生長因子-21為氨基酸序列為SEQ ID No.1的第1-183位所示的蛋白質。

3.成纖維細胞生長因子-21類似物在如下任一中的應用：

（g）制備用于延長血漿的活化部分凝血酶時間和/或凝血酶原時間和/或凝血酶時間的產品；

（h）制備用于降低血液中C反應蛋白和/或炎癥因子和/或凝血因子的水平的產品；

所述炎癥因子為IL-6；所述凝血因子為FVⅡ；

（i）制備用于升高血液中組織型纖溶酶原激活劑水平的產品；

（j）制備用于降低血液中纖溶酶原激活物抑制劑水平的產品；

所述成纖維細胞生長因子-21類似物為由成纖維細胞生長因子-21和類彈性蛋白融合而成的融合蛋白；

所述類彈性蛋白為氨基酸序列為SEQ ID No.1的第184-283位所示的蛋白質；

所述成纖維細胞生長因子-21為氨基酸序列為SEQ ID No.1的第1-183位所示的蛋白質。

4.根據權利要求1-3中任一所述的應用，其特征在于：所述成纖維細胞生長因子-21類似物為氨基酸序列為SEQ ID No.1所示的蛋白質。

5.根據權利要求1-3中任一所述的應用，其特征在于：所述成纖維細胞生長因子-21類似物是按照包括如下步驟的方法制備得到的：

（a1）將所述成纖維細胞生長因子-21類似物的編碼基因克隆入原核表達載體，然后表達得到所述融合蛋白；

（a2）收集所述融合蛋白，進行三次溫度可逆循環后得到所述成纖維細胞生長因子-21類似物；

所述“三次溫度可逆循環”的實現方式如下：1）取所述融合蛋白，用PBS進行3-5倍體積稀釋， 37℃ 19309g離心15min；2）用等體積的PBS重懸離心所得沉淀，然后超聲，設置條件為功率1200w，工作時間1s，間隔時間3s，直至溶液完全澄清，期間保持水浴溫度低于20℃；3）4℃放置30min，然后4℃ 19309g離心20min；4）以步驟3）離心所得上清替代步驟1）中的所述融合蛋白重復步驟1）-3）兩次。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于：所述成纖維細胞生長因子-21類似物的編碼基因為由所述成纖維細胞生長因子-21的編碼基因和所述類彈性蛋白的編碼基因融合而成的融合基因；

所述類彈性蛋白的編碼基因為SEQ ID No.2的第550-849位所示的DNA分子；所述成纖維細胞生長因子-21的編碼基因為SEQ ID No.2的第1-549位所示的DNA分子。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：所述成纖維細胞生長因子-21類似物的編碼基因為SEQ ID No.2所示的DNA分子。

8.生物材料在如下任一中的應用：

（A）制備用于治療和/或預防血栓的產品；

（a）制備用于抑制血栓發生的產品；

（b）制備用于抑制血栓程度的產品；

（c）制備用于降低血漿中纖維蛋白原水平的產品；

（d）制備用于降低血液中紅細胞數和/或血小板數的產品；

（e）制備用于抑制炎癥反應的產品；

（f）制備用于增強溶纖能力的產品；

（g）制備用于延長血漿的活化部分凝血酶時間和/或凝血酶原時間和/或凝血酶時間的產品；

（h）制備用于降低血液中C反應蛋白和/或炎癥因子和/或凝血因子的水平的產品；

所述炎癥因子為IL-6；所述凝血因子為FVⅡ；

（i）制備用于升高血液中組織型纖溶酶原激活劑水平的產品；

（j）制備用于降低血液中纖溶酶原激活物抑制劑水平的產品；

所述生物材料為權利要求1-7任一中所述的成纖維細胞生長因子-21類似物的編碼基因或含有所述編碼基因的重組載體、重組菌或表達盒。