[發(fā)明專(zhuān)利]一種微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的系統(tǒng)及方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810425086.0
• 申請(qǐng)日: 2018-05-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108641926A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-10-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張斌行
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 張斌行
• 主分類(lèi)號(hào): C12M1/26
• 分類(lèi)號(hào): C12M1/26;C12M1/24;C12M1/02;C12M1/00
• 代理公司: 濟(jì)南泉城專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所 37218
• 代理人: 耿媛媛

1.一種微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的系統(tǒng)，其特征在于，包括接種瓶和發(fā)酵罐，其中：

所述接種瓶的瓶口內(nèi)設(shè)置有橡膠塞，所述橡膠塞的中部設(shè)置有第一通孔，所述瓶口的外側(cè)設(shè)置有壓蓋，所述壓蓋把所述橡膠塞壓緊在所述瓶口內(nèi)，所述壓蓋的中部設(shè)置有與所述第一通孔同心的第二通孔；

所述發(fā)酵罐包括罐體和設(shè)置在所述罐體上的密封蓋，所述密封蓋上設(shè)置有補(bǔ)料管，所述補(bǔ)料管上設(shè)置有補(bǔ)料閥，所述補(bǔ)料閥和密封蓋之間設(shè)置有依次連接的第一短節(jié)和第二短節(jié)，所述第一短節(jié)和第二短節(jié)之間設(shè)置有接種閥，所述第二短節(jié)的末端套設(shè)有乳膠管，所述乳膠管的末端套設(shè)有不銹鋼管制插頭，所述不銹鋼管制插頭插設(shè)在所述第一通孔和第二通孔中，所述密封蓋上還設(shè)置有放空閥。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的系統(tǒng)，其特征在于，所述接種瓶的瓶口和壓蓋之間為螺紋連接，所述瓶口上設(shè)置有外螺紋，所述壓蓋上設(shè)置有與所述外螺紋相匹配的內(nèi)螺紋。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的系統(tǒng)，其特征在于，所述接種瓶為耐溫150℃、耐壓0.15MPa、容積5L的聚丙烯塑料瓶，所述第一通孔的直徑為9.5mm，所述第二通孔的直徑為10mm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的系統(tǒng)，其特征在于，所述發(fā)酵罐為豎向設(shè)置，所述發(fā)酵罐的內(nèi)部設(shè)置有攪拌裝置，所述發(fā)酵罐的罐體上方設(shè)置有用于驅(qū)動(dòng)所述攪拌裝置的電機(jī)，所述攪拌裝置的攪拌軸上設(shè)置有攪拌葉片。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的系統(tǒng)，其特征在于，所述發(fā)酵罐內(nèi)設(shè)置有用于檢測(cè)發(fā)酵罐內(nèi)溫度和濕度的溫濕度傳感器，所述溫濕度傳感器與系統(tǒng)的控制裝置連接。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的系統(tǒng)，其特征在于，所述乳膠管為耐溫150℃的乳膠管，所述不銹鋼管制插頭為直徑10mm、長(zhǎng)度100mm的末端具有錐度的不銹鋼管制插頭。

7.一種微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的方法，其特征在于，包括：

步驟1：接種瓶的空瓶滅菌：將所述接種瓶置于滅菌鍋內(nèi)，在一定的壓力和溫度下滅菌一定時(shí)間；

步驟2：搖瓶種子液集中倒入接種瓶?jī)?nèi)：預(yù)先對(duì)無(wú)菌室和超凈平臺(tái)用消毒液消毒、紫外線(xiàn)滅菌，經(jīng)空瓶滅菌的接種瓶送到無(wú)菌室，在超凈平臺(tái)內(nèi)打開(kāi)接種瓶的壓蓋和橡膠塞，將搖瓶培養(yǎng)的種子液倒入接種瓶?jī)?nèi)，把橡膠塞塞入接種瓶瓶口內(nèi)，用壓蓋將橡膠塞壓緊，并用密封膠帶封好，保證瓶口的密封不進(jìn)氣；

步驟3：接種瓶?jī)?nèi)的種子液轉(zhuǎn)接到發(fā)酵罐內(nèi)：待發(fā)酵罐實(shí)罐滅菌連同接種閥、乳膠管一起滅菌結(jié)束后，向發(fā)酵罐內(nèi)通入無(wú)菌空氣，保持發(fā)酵罐內(nèi)一定正壓，發(fā)酵罐的接種管插頭穿透接種瓶的密封膠帶插入接種瓶的壓蓋和橡膠塞內(nèi)，并將接種瓶倒立，開(kāi)啟接種閥，罐內(nèi)無(wú)菌空氣進(jìn)入接種瓶?jī)?nèi)，待發(fā)酵罐內(nèi)壓力與接種瓶壓力平衡后，稍開(kāi)放空閥，發(fā)酵罐內(nèi)壓力低于接種瓶?jī)?nèi)壓力，種子液順利流入罐內(nèi)，由于橡膠塞的彈性，鎖緊不銹鋼管制插頭，杜絕了外部空氣進(jìn)入接種瓶和發(fā)酵罐內(nèi)，最后關(guān)閉接種閥，在保持罐內(nèi)正壓條件下完成接種。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的方法，其特征在于，所述步驟1中，接種瓶空瓶滅菌的壓力為0.12MPa、溫度為120℃、滅菌時(shí)間為30min。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的方法，其特征在于，所述步驟3中，保持發(fā)酵罐內(nèi)的正壓為50-60KPa，待溫度降至38℃時(shí)開(kāi)始接種，當(dāng)稍開(kāi)罐體放空閥時(shí)，罐內(nèi)壓力降至40KPa，接種瓶?jī)?nèi)的種子液在壓差的驅(qū)動(dòng)下全部流進(jìn)發(fā)酵罐。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的微生物發(fā)酵避免接種時(shí)染菌的方法，其特征在于，所述步驟3還包括發(fā)酵罐裝入培養(yǎng)基后進(jìn)行實(shí)罐滅菌，凡液面以上的所有閥門(mén)打開(kāi)，包括：補(bǔ)料閥、接種閥、放空閥，與發(fā)酵罐內(nèi)一同滅菌，罐內(nèi)通入水蒸氣，待罐內(nèi)蒸汽壓力升至0.115MPa、溫度升至116-120℃時(shí)，保溫保壓25min后，關(guān)閉上述所有閥門(mén)，將進(jìn)罐蒸汽切換為無(wú)菌空氣。