[發(fā)明專利]一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810421989.1
• 申請(qǐng)日: 2018-05-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108562669A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周先麗;梁成欽;陳旭;羅群;徐慶;黃四新
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 桂林醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南寧東智知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 45117
• 代理人: 巢雄輝;汪治興

1.一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）羅漢果樣品前處理：

1）烘干：將羅漢果樣品洗凈并于55℃～65℃下烘干，得到干燥的羅漢果樣品；

2）粉碎：將干燥的羅漢果樣品粉碎，得到羅漢果粉末；

3）超聲波提取：將羅漢果粉末放入甲醇中超聲波提取羅漢果甜苷IIA，超聲波提取的工藝參數(shù)為：液料比為0.015g/ml～0.025g/ml，超聲功率為120W，頻率為35KHZ～45KHZ，時(shí)間為35min～45min，得到超聲波提取液；

4）過(guò)濾：用0.40μm～0.50μm微孔膜過(guò)濾超聲波提取液，得到待測(cè)樣品；

（2）制備對(duì)照品溶液：將羅漢果甜苷IIA溶于甲醇中制備得到的羅漢果甜苷IIA對(duì)照品溶液；

（3）HPLC-MS法測(cè)定待測(cè)樣品中羅漢果甜苷IIA含量：

1）液相色譜柱工藝參數(shù)：進(jìn)樣量為1μL，柱溫為20℃～30℃，以甲醇和水做流動(dòng)相，流速為0.8mL.min^-1～1.2mL.min^-1，洗脫模式為二元梯度洗脫，以55%甲醇等度洗脫；

2）質(zhì)譜工藝參數(shù)：選擇離子監(jiān)控模式，離子源為電噴霧離子源，掃描模式為正離子模式，干燥氣溫度為380℃～420℃，干燥氣流速為13L.min^-1～18L.min^-1，霧化氣壓力為220kPa～240kPa,毛細(xì)管電壓為3.3kV～3.7kV, 保留時(shí)間為34.0min。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步驟（1）中將干燥的羅漢果樣品粉碎至350目～400目，得到羅漢果粉末。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步驟（1）中先用0.40μm～0.50μm微孔膜過(guò)濾超聲波提取液，取其濾液，用大孔樹(shù)脂D101對(duì)濾液進(jìn)行吸附，再用50%～70%的酒精水溶液對(duì)濾液進(jìn)行梯度洗脫，最后將洗脫液減壓濃縮，得到待測(cè)樣品。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步驟（3）中設(shè)定保留時(shí)間偏移范圍為±0.075min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步驟（3）中的色譜柱為ZORBAX SB-Aq液相色譜柱。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步驟（3）中質(zhì)譜分析過(guò)程中選擇離子為[M+ Na] ⁺(m/z)823.20。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步驟（3）中液相色譜柱工藝參數(shù)：進(jìn)樣量為1μL，柱溫為25℃，以甲醇和水做流動(dòng)相，流速為1.0mL.min^-1，洗脫模式為二元梯度洗脫，以55%甲醇等度洗脫。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定羅漢果中的羅漢果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步驟（3）中質(zhì)譜工藝參數(shù)：選擇離子監(jiān)控模式，離子源為電噴霧離子源，掃描模式為正離子模式，干燥氣溫度為400℃，干燥氣流速為15L.min^-1，霧化氣壓力為230kPa,毛細(xì)管電壓為3.5kV, 保留時(shí)間為34.0min。