[發(fā)明專利]納米硒負載VP1基因siRNA及其制備方法與應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810419279.5 | 申請日： | 2018-05-04 |
| 公開（公告）號： | CN108841822A | 公開（公告）日： | 2018-11-20 |
| 發(fā)明（設計）人： | 朱冰;李英華;林正方 | 申請（專利權）人： | 廣州市婦女兒童醫(yī)療中心 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;A61K31/713;A61K9/19;A61K47/02;A61P31/14 |
| 代理公司： | 廣州市越秀區(qū)海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295 | 代理人： | 蔡國;馬赟齋 |
| 地址： | 510000 *** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 納米硒 制備方法和應用 基因位點 毛細血管 免疫系統(tǒng) 半衰期 核苷酸 靶標 粒徑 血流 制備 避開 停留 應用 | ||
1.一種納米硒負載VP1基因siRNA，其特征在于，所述siRNA干擾的基因位點為第157位核苷酸；
所述的siRNA序列為：
Sense 5’-ggcaucaucaaaugcuagutt-3’，
Antisense 5’-acuagcauuugaugaugcctt-3’。
2.一種如權利要求1所述的納米硒負載VP1基因siRNA的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟1：將維生素C溶液與亞硒酸鈉溶液于透析袋中混合，攪拌，置于水中進行透析，得純化后納米硒溶液；
步驟2：將所述的納米硒溶液中，加入聚乙烯亞胺和siRNA，使二者終濃度分別為40μM和2.5nM，攪拌，離心棄上清，將沉淀冷凍干燥，即得。
3.根據權利要求2所述的納米硒負載VP1基因siRNA的制備方法，其特征在于，所述步驟1中維生素C溶液的濃度為400μg/ml。
4.根據權利要求2所述的納米硒負載VP1基因siRNA的制備方法，其特征在于，所述步驟1中亞硒酸鈉溶的濃度為400μg/ml。
5.根據權利要求3所述的納米硒負載VP1基因siRNA的制備方法，其特征在于，所述步驟1中維生素C溶液與亞硒酸鈉溶的體積比為1:40。
6.根據權利要求2所述的納米硒負載VP1基因siRNA的制備方法，其特征在于，所述步驟1的攪拌速度為200-300rpm，攪拌時間為0.5-1h。
7.根據權利要求2所述的納米硒負載VP1基因siRNA的制備方法，其特征在于，所述步驟2的攪拌速度為200-300rpm，攪拌時間為0.5-1h。
8.根據權利要求2所述的納米硒負載VP1基因siRNA的制備方法，其特征在于，所述步驟2的離心速度為8000-12000rpm，離心時間為15-30min。
9.根據權利要求2所述的納米硒負載VP1基因siRNA的制備方法，其特征在于，所述步驟1的維生素C溶液與亞硒酸鈉溶液混合的方式為：將維生素C溶液逐滴加入到亞硒酸鈉溶液中。
10.一種如權利要求1所述的納米硒負載VP1基因siRNA應用于制備抑制EV71病毒感染的藥物。
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