[發明專利]一種丁酸梭菌的新型發酵方法

在審

• 申請號: 201810419080.2
• 申請日: 2018-05-04
• 公開（公告）號: CN108300741A
• 公開（公告）日: 2018-07-20
• 發明（設計）人: 邢華;龐德彬;袁霞;王雷;黃飛
• 申請（專利權）人: 江蘇螯龍水產養殖科技有限公司
• 主分類號: C12P7/52
• 分類號: C12P7/52;C12R1/145
• 代理公司: 北京華際知識產權代理有限公司 11676
• 代理人: 李浩

本發明公開了一種丁酸梭菌的新型發酵方法，包括以下步驟：S1、接種發酵：將丁酸梭菌種子液按照體積分數為5?10％的數量比接種至丁酸梭菌發酵培養基，在溫度為35?40℃下培養10?20小時，S2、補料發酵：在所述的步驟S1制備的丁酸梭菌發酵液中流加混合碳源，補料發酵12?24小時，在發酵開始后的12小時、16小時、20小時和24小時等量流加，S3、補堿控制：經過步驟S2補料發酵后的丁酸梭菌發酵液在50?100r/min的攪拌速度下加入20％的碳酸鈉控制丁酸梭菌發酵液pH為6.5；S4、孢子化發酵：在所述的步驟S3補堿控制之后補加鈣、鎂、猛的復合液，孢子化發酵10?25小時。丁酸梭菌利用該發酵方法抑制了發酵過程中乙酸的產生，有利于提高發酵終產物丁酸純化和純度，縮短了發酵時間。

技術領域

本發明屬于微生物發酵工程領域，具體地說，涉及一種丁酸梭菌的新型發酵方法。

背景技術

丁酸梭菌可以作為飼料添加劑在飼料中應用，在動物腸道內可體現五大生物特性：一是促進動物腸道有益菌群的增殖和發育，抑制腸道內有害菌和腐敗菌的生長、繁殖，糾正腸道菌群紊亂，減少腸毒素的發生；二是在動物腸道內能產生B族維生素、維生素K、淀粉酶等物質，具有保健作用；三是丁酸梭菌的主要代謝產物丁酸是腸道上皮組織細胞的再生和修復主要營養物質；四是厭氧或者兼性厭氧芽孢桿菌，不受胃酸、膽汁酸等影響；五是對多種飼用抗生素有較強的耐受性,可配伍使用。丁酸梭菌作為新飼料添加劑的使用，對于減少當前飼料中抗生素產品的濫用、減少藥物在肉品中的殘留、降低動物細菌的耐藥性和保障動物健康方面有著重要的意義。

但是現有的丁酸梭菌在發酵過程中容易產生乙酸，導致發酵終產物丁酸的純度降低，給人們的使用造成了一定的不便，實用性差。

發明內容

本發明的目的在于提供一種丁酸梭菌的新型發酵方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種丁酸梭菌的新型發酵方法，包括以下步驟：

S1、接種發酵：將丁酸梭菌種子液按照體積分數為5-10％的數量比接種至丁酸梭菌發酵培養基，在溫度為35-40℃下培養10-20小時，使得丁酸梭菌快速適應，進入對數分裂期，制備丁酸梭菌的發酵液；

S2、補料發酵：在所述的步驟S1制備的丁酸梭菌發酵液中流加混合碳源，補料發酵12-24小時，在發酵開始后的12小時、16小時、20小時和24小時四個時間點等量流加糖，糖類總量為2％；

S3、補堿控制：經過步驟S2補料發酵后的丁酸梭菌發酵液在50-100r/min的攪拌速度下加入20％的碳酸鈉控制丁酸梭菌發酵液pH為6.5；

S4、孢子化發酵：在所述的步驟S3補堿控制之后補加鈣、鎂、猛的復合液，孢子化發酵10-25小時。

作為本發明進一步方案：上述丁酸梭菌的新型發酵方法，包括以下步驟：

S1、接種發酵：將丁酸梭菌種子液按照體積分數為6-9％的數量比接種至丁酸梭菌發酵培養基，在溫度為35-40℃下培養10-20小時，使得丁酸梭菌快速適應，進入對數分裂期，制備丁酸梭菌的發酵液；

S2、補料發酵：在所述的步驟S1制備的丁酸梭菌發酵液中流加混合碳源，補料發酵12-24小時，在發酵開始后的12小時、16小時、20小時和24小時四個時間點等量流加糖，糖類總量為2％；

S3、補堿控制：經過步驟S2補料發酵后的丁酸梭菌發酵液在60-90r/min的攪拌速度下加入20％的碳酸鈉控制丁酸梭菌發酵液pH為6.5；

S4、孢子化發酵：在所述的步驟S3補堿控制之后補加鈣、鎂、猛的復合液，孢子化發酵10-25小時。

作為本發明再進一步方案：上述丁酸梭菌的新型發酵方法，包括以下步驟：