[發明專利]一種丁酸梭菌的新型發酵方法

在審

• 申請號: 201810419080.2
• 申請日: 2018-05-04
• 公開（公告）號: CN108300741A
• 公開（公告）日: 2018-07-20
• 發明（設計）人: 邢華;龐德彬;袁霞;王雷;黃飛
• 申請（專利權）人: 江蘇螯龍水產養殖科技有限公司
• 主分類號: C12P7/52
• 分類號: C12P7/52;C12R1/145
• 代理公司: 北京華際知識產權代理有限公司 11676
• 代理人: 李浩

1.一種丁酸梭菌的新型發酵方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、接種發酵：將丁酸梭菌種子液按照體積分數為5-10％的數量比接種至丁酸梭菌發酵培養基，在溫度為35-40℃下培養10-20小時，使得丁酸梭菌快速適應，進入對數分裂期，制備丁酸梭菌的發酵液；

S2、補料發酵：在所述的步驟S1制備的丁酸梭菌發酵液中流加混合碳源，補料發酵12-24小時，在發酵開始后的12小時、16小時、20小時和24小時四個時間點等量流加糖，糖類總量為2％；

S3、補堿控制：經過步驟S2補料發酵后的丁酸梭菌發酵液在50-100r/min的攪拌速度下加入20％的碳酸鈉控制丁酸梭菌發酵液pH為6.5；

S4、孢子化發酵：在所述的步驟S3補堿控制之后補加鈣、鎂、猛的復合液，孢子化發酵10-25小時。

2.根據權利要求1所述的一種丁酸梭菌的新型發酵方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、接種發酵：將丁酸梭菌種子液按照體積分數為6-9％的數量比接種至丁酸梭菌發酵培養基，在溫度為35-40℃下培養10-20小時，使得丁酸梭菌快速適應，進入對數分裂期，制備丁酸梭菌的發酵液；

S2、補料發酵：在所述的步驟S1制備的丁酸梭菌發酵液中流加混合碳源，補料發酵12-24小時，在發酵開始后的12小時、16小時、20小時和24小時四個時間點等量流加糖，糖類總量為2％；

S3、補堿控制：經過步驟S2補料發酵后的丁酸梭菌發酵液在60-90r/min的攪拌速度下加入20％的碳酸鈉控制丁酸梭菌發酵液pH為6.5；

S4、孢子化發酵：在所述的步驟S3補堿控制之后補加鈣、鎂、猛的復合液，孢子化發酵10-25小時。

3.根據權利要求1所述的根據權利要求1所述的一種丁酸梭菌的新型發酵方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、接種發酵：將丁酸梭菌種子液按照體積分數為8％的數量比接種至丁酸梭菌發酵培養基，在溫度為35-40℃下培養10-20小時，使得丁酸梭菌快速適應，進入對數分裂期，制備丁酸梭菌的發酵液；

S2、補料發酵：在所述的步驟S1制備的丁酸梭菌發酵液中流加混合碳源，補料發酵12-24小時，在發酵開始后的12小時、16小時、20小時和24小時四個時間點等量流加糖，糖類總量為2％；

S3、補堿控制：經過步驟S2補料發酵后的丁酸梭菌發酵液在80r/min的攪拌速度下加入20％的碳酸鈉控制丁酸梭菌發酵液pH為6.5；

S4、孢子化發酵：在所述的步驟S3補堿控制之后補加鈣、鎂、猛的復合液，孢子化發酵10-25小時。

4.根據權利要求1-3任一所述的一種丁酸梭菌的新型發酵方法，其特征在于，所述的丁酸梭菌發酵培養基的營養成分，按質量百分數計，包括以下組分：葡萄糖2.0％、氮源2.8％、酵母浸份1.8％、硫酸銨0.1％、碳酸氫鈉0.124％、玉米漿粉0.33％，余量為無菌水。

5.根據權利要求1-3任一所述的一種丁酸梭菌的新型發酵方法，其特征在于，所述的步驟S1中丁酸梭菌種子液進入丁酸梭菌發酵培養基內以后按照轉速80-160r/min的速度進行攪拌，所述的步驟S1在厭氧環境下培養；所述的步驟S1中丁酸梭菌發酵培養液的pH為6.0-6.5之間。

6.根據權利要求1-3任一所述的一種丁酸梭菌的新型發酵方法，其特征在于，所述的步驟S2中的糖類為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和果糖中的一種或幾種混合物。

7.根據權利要求1-3任一所述的一種丁酸梭菌的新型發酵方法，其特征在于，所述的步驟S2中丁酸梭菌發酵外源控制加入0.1％的乙酸鈉。

8.根據權利要求1-3任一所述的一種丁酸梭菌的新型發酵方法，其特征在于，所述步驟S4復合液中鈣、鎂、猛離子分別占復合液質量分數為0.05％、0.02％、0.02％，其余為無菌水。