[發明專利]一種活體單細胞原位切割方法及裝置

有效

• 申請號: 201810413114.7
• 申請日: 2018-05-03
• 公開（公告）號: CN108384718B
• 公開（公告）日: 2023-08-25
• 發明（設計）人: 林金明;毛思鋒;張強
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: C12M3/04
• 分類號: C12M3/04;C12M1/34;C12M1/33;C12N1/06
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 吳大建;陳偉

本發明提供了一種活體單細胞原位切割方法，包括通過向所述待切割細胞同時注入細胞培養基溶液和細胞裂解液，從而裂解待切割細胞。本發明同時提供了一種活體單細胞原位切割裝置，包括：細胞操縱平臺，其上培養有待切割細胞；位于所述細胞操縱平臺上方的微流體探針，用于向所述待切割細胞同時注入細胞培養基溶液和細胞裂解液，從而裂解待切割細胞。所述微流體探針包括：沿所述微流體探針的圓周方向依次設置的第一吸附管、細胞培養基溶液注入管、第二吸附管和細胞裂解液注入管。本發明的方法和裝置能在最大程度保持細胞為原始狀態的情況下，對細胞的某一部分進行原位切割。

技術領域

本發明屬于細胞研究技術領域，涉及一種活體單細胞原位切割方法及裝置，尤其涉及一種貼壁活體單細胞原位切割方法及裝置。

背景技術

貼壁細胞通常會表現出明顯的極性，即細胞兩端在結構與功能上表現出明顯的差異性。對于單個細胞不同部位行為的研究(比如組成、結構以及對于外界刺激的響應等)將會促進人們對于生命現象的理解，而傳統的單細胞分析手段難以在單個細胞的不同位置進行取樣及分析，因此開發一種能夠對單個細胞不同部位進行分析的技術將至關重要。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術存在的技術問題，提供一種活體單細胞原位切割方法及裝置，本發明的方法和裝置尤其適合用于貼壁活體單細胞原位切割，本發明的方法和裝置能在最大程度保持細胞為原始狀態的情況下，對細胞的某一部分進行原位切割。

為達到本發明的目的，本發明一方面提供了一種活體單細胞原位切割方法，包括通過向所述待切割細胞的某一細胞位置同時注入細胞培養基溶液和細胞裂解液，從而從某一細胞位置裂解待切割細胞。

根據本發明的一些實施方式，所述細胞培養基溶液和細胞裂解液以相同的速度注入。

通過向所述待切割細胞以相同速度持續注入細胞培養基溶液和細胞裂解液，同時以更高的速度同時吸走待切割細胞培養裝置中原有的細胞培養基。當吸走液體的速度大于兩倍注入液體的速度時，能夠在待切割細胞周圍形成微區分布，所述微區包括截面積相等的細胞裂解液區域和細胞培養基區域，從而能夠定向地裂解待切割細胞處于裂解液區域的部分。

根據本發明的優選實施例，將所述待切割細胞培養在培養裝置中，在注入細胞培養基溶液和細胞裂解液的同時，吸走待切割細胞培養裝置中原有的細胞培養基。

根據本發明的優選實施方式，所述細胞培養基溶液包括但不限于MEM、DMEM、RPMI-1640和199細胞培養基。

根據本發明的一些實施例，所述細胞裂解液包括各種商業化的或自行配置的具有細胞裂解功能的溶液。

根據本發明的一些實施方式，通過微流體探針向所述待切割細胞同時注入細胞培養基溶液和細胞裂解液，從而裂解待切割細胞。

根據本發明的優選實施例，所述微流體探針包括：

沿所述微流體探針的圓周方向依次設置的第一吸附管、細胞培養基溶液注入管、第二吸附管和細胞裂解液注入管。

根據本發明的優選實施例，所述第一吸附管和第二吸附管相對設置；所述細胞培養基溶液注入管和細胞裂解液注入管相對設置；所述細胞培養基溶液注入管與所述第一吸附管和第二吸附管分別相鄰設置；所述細胞裂解液注入管與所述第一吸附管和第二吸附管分別相鄰設置。

根據本發明的一些實施例，所述第一吸附管和第二吸附管的下端為尖端，上端連接液體吸附裝置，用于吸走待切割細胞培養裝置中的液體。

在一些具體的實施例中，所述第一吸附管和第二吸附管的下端為錐形尖端，所述尖端的直徑為25-100微米，優選為40微米。

根據本發明的優選實施方式，所述第一吸附管和第二吸附管為玻璃材質，其內徑為100-250微米，優選為250微米。