[發明專利]一種用于多重聚合酶鏈反應檢測的液滴在審
| 申請號: | 201810404018.6 | 申請日: | 2018-04-28 |
| 公開(公告)號: | CN108676861A | 公開(公告)日: | 2018-10-19 |
| 發明(設計)人: | 王策;白鵬利 | 申請(專利權)人: | 中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/686 | 分類號: | C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 韓飛 |
| 地址: | 215163 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 液滴 多重聚合酶鏈反應 聚合酶鏈反應 模板分子 內容物 特征物 微滴 固體材料表面 多重PCR反應 被放大信號 表面包裹 定量檢測 定性檢測 反應條件 固體材料 核酸分子 核酸擴增 擴增反應 生物反應 相對獨立 相容的 檢測 外部 | ||
1.一種用于多重聚合酶鏈反應檢測的液滴,其特征在于,包括一般內容物、表面和特征物;
其中,所述一般內容物分布于液滴內部,包括聚合酶鏈反應引物、脫氧核糖核苷三磷酸、酶、生物探針、金屬離子,為聚合酶鏈反應提供反應條件;
所述表面包裹于液滴外部,形成穩定的液滴界面;
所述特征物位于液滴的內部,是生物反應相容的固體材料;所述固體材料表面固載有模板分子鏈;所述模板分子鏈通過聚合酶鏈反應被放大信號,用于定性檢測或者定量檢測。
2.根據權利要求1所述的液滴,其特征在于,所述液滴的體積為常規聚合酶鏈反應體系的1/1000-1/10000000,其中典型液滴的體積為0.01納升-100納升。
3.根據權利要求1所述的液滴,其特征在于,所述特征物為編碼微粒,每個液滴中最多含有一個編碼微粒,每個編碼微粒與單一種屬的模板分子鏈偶聯,形成映射關系;其中,所述模板分子因堿基序列不同為相異種屬;所述每個編碼微粒具有各自的編碼特征。
4.根據權利要求3所述的液滴,其特征在于,所述液滴用于同一反應體系中多重聚合酶鏈反應的反應物檢測,通過編碼微粒的編碼特征來確定模板分子鏈的種屬。
5.根據權利要求3所述的液滴,其特征在于,所述液滴用于多重數字聚合酶鏈反應體系,通過識別計數包含不同編碼微粒的液滴,實現數字聚合酶鏈反應中的多重定量檢測。
6.根據權利要求3所述的液滴,其特征在于,所述編碼微粒的編碼方式包括光學編碼、結構編碼和物質種類編碼。
7.根據權利要求6所述的液滴,其特征在于,所述光學編碼采用熒光強度編碼、熒光波長種類編碼、光譜學特征編碼及組合編碼。
8.根據權利要求6所述的液滴,其特征在于,所述結構編碼采用微粒大小編碼、多種微粒組合及位置順序編碼、微粒上的微圖像結構編碼。
9.根據權利要求6所述的液滴,其特征在于,所述物質種類編碼采用微粒材料種類及質譜學特征編碼。
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