[發明專利]犬副流感病毒單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 201810401168.1
• 申請日: 2018-04-28
• 公開（公告）號: CN110412267B
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發明（設計）人: 田克恭;郝麗影
• 申請（專利權）人: 洛陽普泰生物技術有限公司;北京中科基因技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577
• 代理公司: 北京華夏正合知識產權代理事務所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

1.一種特異性結合犬副流感病毒的鼠單克隆抗體2B7的可變區序列，其中，1)重鏈可變區氨基酸序列為SEQ?ID?No.1編碼的氨基酸序列或該序列經過一個或多個氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體；2)輕鏈可變區氨基酸序列為SEQ?ID?No.2編碼的氨基酸序列或該序列經過一個或多個氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體。

2.一種抗體或抗體片段，其中，所述抗體或抗體片段具有權利要求1所述的鼠單克隆抗體2B7的可變區序列，所述抗體或抗體片段能特異地結合犬副流感病毒。

3.根據權利要求2所述的抗體或抗體片段，其中，所述抗體為單克隆抗體2B7，所述單克隆抗體2B7重鏈可變區氨基酸序列為SEQ?ID?No.1編碼的氨基酸序列，其輕鏈可變區氨基酸序列為SEQ?ID?No.2編碼的氨基酸序列。

4.一種特異性結合犬副流感病毒的鼠單克隆抗體4H1的可變區序列，其中，1)重鏈可變區氨基酸序列為SEQ?ID?No.3編碼的氨基酸序列或該序列經過一個或多個氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體；2)輕鏈可變區氨基酸序列為SEQ?ID?No.4編碼的氨基酸序列或該序列經過一個或多個氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體。

5.一種抗體或抗體片段，其中，所述抗體或抗體片段具有權利要求4所述的鼠單克隆抗體4H1的可變區序列，所述抗體或其片段能特異地結合犬副流感病毒。

6.根據權利要求5所述的抗體或抗體片段，其中，所述抗體為單克隆抗體4H1，所述單克隆抗體4H1重鏈可變區氨基酸序列為SEQ?ID?No.3編碼的氨基酸序列，其輕鏈可變區氨基酸序列為SEQ?ID?No.4編碼的氨基酸序列。

7.一種犬副流感病毒檢測試劑盒，所述試劑盒包括有效量的所述單克隆抗體2B7、有效量的金標記所述單克隆抗體4H1，或有效量的所述單克隆抗體4H1、有效量的金標所述單克隆抗體2B7，以及對犬副流感病毒抗原抗體反應進行檢測的檢測試劑。

8.根據權利要求7所述的犬副流感病毒檢測試劑盒，其中，所述試劑盒包括有效量的所述單克隆抗體2B7、有效量的金標記所述單克隆抗體4H1，以及對犬副流感病毒抗原抗體反應進行檢測的檢測試劑，其中，所述試劑盒包括膠體金檢測試紙條，所述膠體金檢測試紙條包括：底板，所述底板具有第一端和第二端，并且沿所述第一端向第二端的方向上依次有樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述硝酸纖維素膜與金標墊接觸或與樣品墊、金標墊接觸使得犬副流感病毒抗原與所述單克隆抗體4H1的結合體能在其上向底板第二端遷移；所述金標墊上含有膠體金標記的所述單克隆抗體4H1，所述硝酸纖維素膜上包括檢測線和質控線，所述檢測線上固定化有所述單克隆抗體2B7，所述質控線上固定化有羊抗鼠多抗或羊抗鼠二抗；其中，所述有效量的所述單克隆抗體2B7含量為1～3mg/ml，所述有效量的所述單克隆抗體4H1膠體金標記時含量為20～150μg/ml，所述羊抗鼠多抗或羊抗鼠二抗含量為2mg/ml。

9.根據權利要求8所述的犬副流感病毒檢測試劑盒，其中，所述有效量的單克隆抗體2B7含量為2～3mg/ml，有效量的所述單克隆抗體4H1膠體金標記時含量為50～150μg/ml。

10.根據權利要求7所述的犬副流感病毒檢測試劑盒，其中，所述金標墊上含有膠體金標記的所述單克隆抗體4H1和膠體金標記的所述單克隆抗體1G5，所述硝酸纖維素膜上包括固定化有所述單克隆抗體2B7的檢測線，還包括固定化有所述單克隆抗體6E11的檢測線，有效量的所述單克隆抗體6E11含量為1～3mg/ml，所述有效量的所述單克隆抗體1G5膠體金標記時含量為20～50μg/ml；所述單克隆抗體1G5由保藏號為CCTCC?No：C2015201的小鼠骨髓雜交瘤細胞1G5株分泌，所述單克隆抗體6E11由保藏號為CCTCCNo：C2015202的小鼠骨髓雜交瘤細胞6E11株分泌。