[發(fā)明專利]破傷風(fēng)免疫球蛋白血樣篩選試劑盒、制備方法及使用方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810388035.5
• 申請日: 2018-04-26
• 公開（公告）號: CN108918880A
• 公開（公告）日: 2018-11-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃晶;王諾;彭芳霽;曾強;吳邊;羅玉東
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢生命科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 徐楊松

本發(fā)明涉及一種破傷風(fēng)免疫球蛋白血樣篩選試劑盒，試劑盒包括破傷風(fēng)類毒素滅活精純抗原包被的酶標(biāo)板、抗破傷風(fēng)桿菌抗體、酶標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)品溶液；所述酶標(biāo)板上包被的破傷風(fēng)類毒素滅活精純抗原的蛋白質(zhì)濃度為0.5?3.0ug/ml；所述酶標(biāo)記物包括穩(wěn)定劑A、生物防腐劑和辣根過氧化物酶標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體，所述鼠抗人IgG單克隆抗體的蛋白濃度大于等于5mg/ml。一種破傷風(fēng)免疫球蛋白血樣篩選試劑盒的制備方法，包括如下步驟：制備破傷風(fēng)類毒素滅活精純抗原包被的酶標(biāo)板；酶標(biāo)記物的制備；進(jìn)行濃縮洗滌液、樣品稀釋液、底物液A、底物液B、終止液、標(biāo)準(zhǔn)品溶液的分裝。本發(fā)明的有益效果為：能檢測血清、血漿及全血。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域，尤其涉破傷風(fēng)免疫球蛋白血樣篩選試劑盒、制備方法及使用方法。

背景技術(shù)

破傷風(fēng)(tetanus)一詞來源于希臘語，表示痙攣的意思，經(jīng)常發(fā)生在創(chuàng)傷之后。如果機體傷口被厭氧的破傷風(fēng)梭菌感染，該細(xì)菌就會在缺氧的環(huán)境下生長并產(chǎn)生外毒素而引起的急性、致死性的神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

破傷風(fēng)梭菌是梭菌屬成員，革蘭陽性厭氧菌。芽孢呈正圓形，位于菌體一端，使菌體呈鼓槌狀。芽孢抵抗力極強，在自然界中分布廣泛，土壤、人和動物的糞便中都能分離到。破傷風(fēng)梭菌有菌體抗原和鞭毛抗原。本菌可產(chǎn)生兩種外毒素，一種為破傷風(fēng)溶血素(tetanolysin)只在培養(yǎng)初期產(chǎn)生以后逐漸減少并消失。另一種為破傷風(fēng)痙攣毒素(tetanospasmin)是一種神經(jīng)毒素，與破傷風(fēng)梭菌的致病性有關(guān)，即通常所指的破傷風(fēng)毒素。

破傷風(fēng)的預(yù)防主要依賴于抗體，并且只能通過主動免疫(破傷風(fēng)疫苗)或被動免疫(破傷風(fēng)特異性免疫球蛋白)實現(xiàn)。破傷風(fēng)疫苗由破傷風(fēng)類毒素制成，后者是一種經(jīng)過處理的神經(jīng)毒素，可誘導(dǎo)產(chǎn)生保護性的抗毒素。經(jīng)過免疫的孕婦可將抗毒素經(jīng)胎盤傳遞給胎兒，從而防止新生兒發(fā)生破傷風(fēng)。

目前市場上的破傷風(fēng)桿菌IgG抗體酶聯(lián)免疫檢測試劑樣品采用血清/血漿，需血量多且需靜脈抽血，基層使用存在諸多不便，尤其是低年齡組兒童采血更為困難，有的試劑還存在促凝劑對檢測的干擾等問題。因此推出效期長、操作簡便，適用于血清、血漿、全血檢測的試劑已成為當(dāng)務(wù)之急。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供破傷風(fēng)免疫球蛋白血樣篩選試劑盒、制備方法及使用方法，以克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下：一種破傷風(fēng)免疫球蛋白血樣篩選試劑盒，試劑盒包括破傷風(fēng)類毒素滅活精純抗原包被的酶標(biāo)板、抗破傷風(fēng)桿菌抗體、酶標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)品溶液；所述酶標(biāo)板上包被的破傷風(fēng)類毒素滅活精純抗原的蛋白質(zhì)濃度為0.5-3.0ug/ml；所述酶標(biāo)記物包括穩(wěn)定劑A、生物防腐劑和辣根過氧化物酶標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體，所述鼠抗人IgG單克隆抗體的蛋白濃度大于等于5mg/ml。

本發(fā)明的有益效果是：

1)采用酶聯(lián)免疫吸附法，能較膠體金機讀出準(zhǔn)確的數(shù)值；

2)精純的抗原包被，且使用濃度低，能有效的降低成本，使產(chǎn)品最終價格低廉，市場競爭力強，產(chǎn)品穩(wěn)定，且效價高；

3)能檢測血清、血漿及全血。

在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本發(fā)明還可以做如下改進(jìn)。

進(jìn)一步，所述辣根過氧化物酶的酶純度大于等于3.0。

進(jìn)一步，所述標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度分別為0.1IU/ml、1.0IU/ml、2.0IU/ml、4.0IU/ml、8.0IU/ml和12.0IU/ml。

采用上述進(jìn)一步的有益效果為：抗體檢測濃度范圍在0.1～12IU/ml，既能滿足血漿站收集驗證獻(xiàn)血者合格血樣，又能做普通人抗體檢測，判斷個體或群體免疫成功與否。

進(jìn)一步，試劑盒還包括濃縮洗滌液、樣品稀釋液、底物液A、底物液B和終止液。