[發明專利]一種條斑紫菜抗氧化蛋白肽的制備方法

有效

• 申請號: 201810385544.2
• 申請日: 2018-04-26
• 公開（公告）號: CN108517343B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 黃君陽
• 申請（專利權）人: 廈門元之道生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C12R1/225
• 代理公司: 廈門加減專利代理事務所(普通合伙) 35234
• 代理人: 王春霞

1.一種條斑紫菜抗氧化蛋白肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S100、以條斑紫菜為原料進行粉碎處理、水提取、滅菌處理，得到浸提液；

S200、將得到的浸提液接種乳酸菌進行發酵，乳酸菌的接種量為1％～3％，發酵溫度為35℃～40℃，發酵時間20～36小時，發酵后將混合液進行滅菌處理；

S300、將滅菌后的混合液采用木瓜蛋白酶進行酶解處理，木瓜蛋白酶添加量為條斑紫菜質量的0.5％～2％，酶解溫度為55℃～65℃，酶解反應時間為2～4小時；酶解結束后進行滅活處理，冷卻后，進行離心分離，收集上清液；

S400、將收集的上清液過濾后，進行干燥，即得條斑紫菜抗氧化蛋白肽；

S300中：酶解2～4小時后，控制溫度在0℃～5℃，往反應室中沖入氮氣，用減壓閥調整進氣量2升/小時,充氣時間2h,反應室壓力控制1.5bar；同時采用超聲處理，并用紫外光照射12min～15min；紫外光處理結束后，繼續通入氮氣反應室壓力控制1.0bar，溫度升至在100℃下，處理時間為15min進行滅活；自然冷卻后，5000r/min離心15分鐘，收集上清液；

S400中：將上清液進行過濾的方法包括：采用規格為Φ1.0×150cm的層析柱，裝入吸附樹脂HPD400A，對上述清液抽濾，再用截留分子量10Ka的超濾膜對上清液除雜，收集得到濾液。

2.根據權利要求1所述條斑紫菜抗氧化蛋白肽的制備方法，其特征在于，S100中，所述粉碎處理、水提取、滅菌包括：將條斑紫菜粉碎后與水按照料水比為1:20～1:50混合，經攪拌處理20min～30min進行浸提；所述料水比的單位為g/mL；

將得到的浸提液于115℃～125℃下處理10min～30min進行殺滅病原菌后冷卻至30℃～40℃備用。

3.根據權利要求1所述條斑紫菜抗氧化蛋白肽的制備方法，其特征在于：步驟S200中，所述乳酸菌包括保加利亞乳桿菌、發酵乳桿菌、瑞士乳桿菌、植物乳桿菌中的至少一種。

4.根據權利要求1所述條斑紫菜抗氧化蛋白肽的制備方法，其特征在于：步驟S200中，乳酸菌接種浸提液前，接種于MRS培養基，活化10～12小時，培養溫度為37℃，搖床轉速200轉/分。

5.根據權利要求4所述條斑紫菜抗氧化蛋白肽的制備方法，其特征在于，MRS培養基成分為：酪蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖5g/L，乙酸鈉5g/L，檸檬酸二胺2g/L，吐溫80 1g/L，磷酸氫二鉀2g/L,七水硫酸鎂0.2g/L，七水硫酸錳0.05g/L，碳酸鈣20g/L；

所述MRS培養基的pH為6.8，并于115℃滅菌30min～40min。

6.根據權利要求1所述條斑紫菜抗氧化蛋白肽的制備方法，其特征在于，S400中干燥方法包括：采用真空干燥箱，將濃縮液干燥成粉；濃縮干燥溫度為55℃～60℃，干燥時間為10h～15h。