[發明專利]一種羥乙基殼聚糖復合凝膠的制備方法

在審

• 申請號: 201810378975.6
• 申請日: 2018-04-25
• 公開（公告）號: CN108310462A
• 公開（公告）日: 2018-07-24
• 發明（設計）人: 聶磊;李星辰;武巧運;張慶茜;董婧
• 申請（專利權）人: 信陽師范學院
• 主分類號: A61L27/26
• 分類號: A61L27/26;A61L27/50;A61L27/52;C08B37/08
• 代理公司: 南京業騰知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32321
• 代理人: 鄭婷

本發明涉及一種羥乙基殼聚糖復合凝膠的制備方法，首先采用特殊工藝對殼聚糖進行羥乙基化，再加入明膠，通過化學交聯和冷凍干燥制得復合凝膠。本發明制備工藝簡單，原料簡單，成本低，制得的復合凝膠具有較好的生物活性，可以用于細胞裝載，同時可能具備抗菌性能，這種新型復合凝膠能更好地應用于軟骨修復方面。

技術領域

本發明涉及一種羥乙基殼聚糖復合凝膠的制備方法，屬于生物醫學材料技術領域。

背景技術

殼聚糖是由自然界廣泛存在的幾丁質經過脫乙酰作用得到的，這種天然高分子具有生物相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性等優良性能，是制備生物醫用領域中一種較好的材料。殼聚糖凝膠在制備過程中需要通過交聯，交聯劑通常選用戊二醛或者水溶性碳化二亞胺，交聯劑的引入會降低支架的細胞相容性。

明膠也常用于制備生物醫用凝膠，可以與殼聚糖復合制備凝膠用于細胞裝載，但是與殼聚糖制備的凝膠裝載細胞時，細胞的活性還有待提高。

發明內容

本發明的目的在于解決現有技術的不足，提供一種羥乙基殼聚糖復合凝膠的制備方法，該復合凝膠具有良好的細胞裝載性能，能夠使細胞很好的附著、增殖，能更好的應用于軟骨修復方面。

技術方案

一種羥乙基殼聚糖復合凝膠的制備方法，包括如下步驟：

(1)制備羥乙基殼聚糖：取10g殼聚糖加入到15～18g的50wt％氫氧化鈉溶液中進行堿化，得到殼聚糖溶液，在-20℃條件下靜置1～3h后，加入15～25ml溶劑異丙醇，攪拌升溫至70～80℃，再攪拌冷卻至室溫，然后加入130～180ml異丙醇和15～19ml 2-氯乙醇的混合溶液，攪拌均勻后，采用鹽酸溶液調pH7，再采用無水乙醇洗滌，然后進行透析，最后冷凍干燥，即得羥乙基殼聚糖

(2)制備復合凝膠：將羥乙基殼聚糖溶解在1v％的醋酸溶液中，得到羥乙基殼聚糖溶液，羥乙基殼聚糖濃度為2-5wt％，往羥乙基殼聚糖溶液中加入明膠，羥乙基殼聚糖與明膠質量比為1:3～5:1，攪拌均勻后進行超聲處理，然后將溶液倒入48孔板中，循環冷凍解凍處理3～9次，最后放入冷凍干燥機進行冷凍干燥，即得。

進一步，步驟(1)中，所述堿化在-20℃冰箱內進行，堿化時間超過24h。

進一步，步驟(1)中，鹽酸溶液濃度為0.1M。

進一步，步驟(1)中，透析選用的是截留分子量在10000Da的透析袋，透析時間為2d以上。

進一步，步驟(2)中，所述循環冷凍解凍處理是指：將48孔板放入-20℃冰箱內冷凍24小時，然后拿出來常溫下解凍12個小時，然后再放入-20℃冰箱內冷凍。

進一步，步驟(2)中，羥乙基殼聚糖與明膠質量比為2:1。

進一步，步驟(2)中，所述超聲處理采用的是功率為1000W的超聲儀，超聲時間不超過5min。

本發明的有益效果：本發明將殼聚糖進行羥乙基化，然后加入特定比例的明膠，制備成復合凝膠。與現有技術相比，本發明的優勢在于：①該復合凝膠具有更好的力學性能、生物活性和細胞裝載性能，可以使細胞更好的附著，讓其更好的增殖；②整個制備過程簡單易操作，可以進行大量的制備；③采用的高分子材料成本較低，無污染。

附圖說明

圖1為實施例1-3制得的羥乙基殼聚糖復合凝膠的掃描電鏡圖；

圖2為實施例1-6制得的羥乙基殼聚糖復合凝膠的細胞相容性檢測結果；

圖3為實施例3制備的羥乙基殼聚糖復合凝膠裝載成骨細胞后的AO染色圖。

具體實施方式