[發明專利]一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法在審
| 申請號： | 201810378903.1 | 申請日： | 2018-04-25 |
| 公開（公告）號： | CN108753908A | 公開（公告）日： | 2018-11-06 |
| 發明（設計）人： | 成玉梅;葉紅朝;李淑君;趙世民;康業斌;李成軍;王惠;苗圃;康蕾;李小杰;石秋環;王海濤;白靜科;陳奇園;董昆樂 | 申請（專利權）人： | 河南科技大學;河南省煙草公司洛陽市公司;河南省農業科學院煙草研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/18 | 分類號： | C12Q1/18 |
| 代理公司： | 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120 | 代理人： | 孫笑飛 |
| 地址： | 471000 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 煙草疫霉 放線菌菌株 接種 放線菌 培養皿 拮抗 長方形條 快速篩選 拮抗作用 恒溫箱 活化 抑菌 涂抹 測量 放線菌篩選 培養皿中心 工作效率 重復試驗 放入 抗生素 篩選 釋放 節約 表現 | ||
1.一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，將放線菌和煙草疫霉接種至裝有PDA培養基的培養皿，通過測量抑菌帶篩選出對煙草疫霉具有拮抗作用的放線菌菌株，其特征在于：所述的培養皿中設置有四個繞其中心分布的長方形條帶區域，活化后的放線菌涂抹在四個長方形條帶區域內，并在接種煙草疫霉之前，將涂抹過放線菌的培養皿放入恒溫箱中培養2—4天，然后再在培養皿中心接種活化后的煙草疫霉，在恒溫箱中培養后測量抑菌帶。
2.如權利要求1所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：所述的四個長方形條帶區域繞培養皿中心均勻分布，且四個長方形條帶區域外切于同一個圓周。
3.如權利要求2所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：所述培養皿的直徑為9cm，長方形條帶區域的長度為2cm，寬度為4mm，長方形條帶區域與培養皿中心的垂直距離為3cm。
4.如權利要求1或3所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：接種至培養皿中心的煙草疫霉直徑為6mm。
5.如權利要求1所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：在將活化后的煙草疫霉接種至所述培養皿的同時，在另一個同樣裝有PDA培養基的培養皿的中心接入活化后的煙草疫霉作為參照，通過對比測量出抑菌帶。
6.如權利要求1所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：所述恒溫箱中控制培養溫度為25℃。
7.如權利要求1所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：分離獲得的放線菌菌株在篩選之前，先在高氏一號培養基上劃線活化培養3-5d。
8.如權利要求1所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：煙草疫霉菌株先在PDA培養基活化培養2-4d，然后再用于篩選放線菌。
9.如權利要求7所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：所述高氏一號培養基的成分為：每1000mL培養基含可溶性淀粉20 g、KNO3 1 g、NaCl 0.5 g、K2HPO4 0.5g、FeSO4·7H2O 0.01 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、瓊脂15~20 g，余量為水，培養基pH值為 7.2~7.4。
10.如權利要求8所述的一種快速篩選煙草疫霉拮抗放線菌菌株的方法，其特征在于：所述PDA培養基的成分為：每1000mL培養基含馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g，余量為水，培養基pH值為7.0。
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