[發明專利]一種多藻蛋白酶解制備多肽的方法

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• 申請號: 201810373166.6
• 申請日: 2018-04-24
• 公開（公告）號: CN108517342A
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發明（設計）人: 陸新軍
• 申請（專利權）人: 陸新軍
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種多藻蛋白酶解制備多肽的方法，通過對含油量較高的小球藻進行提油處理，配合適量的螺旋藻和裸藻，均質后在pH3?5條件下使用胃蛋白酶和菠蘿蛋白酶的復合酶進行酶解，能有效提高水溶性蛋白及多肽的轉化率，經超濾離心后得到的產品的形態具有較好地表面形態和均一性。

技術領域

本發明涉及保健品技術領域，尤其涉及一種多藻蛋白酶解制備多肽的方法。

背景技術

目前，小球藻(Chlorella pyenoidosa)是一類普生性單細胞綠藻，屬于綠藻門、小球藻屬，生長速度快，易于培養，應用價值高。小球藻含有豐富的生物活性物質和藥用成分，作為一種新型保健食品和藥物蘊藏著巨大潛力。小球藻具有抗腫瘤活性、增加免疫力、解毒保肝、降壓作用等，其粗蛋白含量高(50％左右)，品質好，已經成為小球藻應用領域十分活躍、備受重視的一個方面。

螺旋藻營養成分的特點是蛋白質含量高，而脂肪、纖維素含量低，并且還含有種類繁多的維生素，它是維生素B12和β-胡蘿卜素含量最高的食品，螺旋藻所含的類脂幾乎全都是重要的不飽和脂肪酸類，膽固醇含量極微。

裸藻富含人體所必需的維生素、礦物質、蛋白質、脂類、碳水化物等多種營養素和生物活性物質，具有抗氧化、降血脂、降血糖和抗腫瘤等多種生物學功效。目前國內外廠家生產的裸藻干粉，是采用將裸藻脫水干燥后再研磨成粉末的工藝制備而成。在制備裸藻干粉的過程中，包繞著裸藻細胞內容物的表層漿膜被直接干燥。由于該漿膜是由蛋白、脂類和糖類等物質組成，干燥后穩定性極強，很不易在人體胃腸道中消化，并會因此而影響機體對裸藻細胞內物質的吸收，也必將會因此而影響裸藻的生物活性。裸藻干燥重量中百分之五十是蛋白質，其質量優于植物產生的蛋白質，內含20種氨基酸，其中有異亮氨酸等9種人體必需的氨基酸，比小球藻更適合作為食品。

但這三種藻中所含的蛋白質均需通過人體的消化后才能被吸收。生物活性肽是指那些具有特殊生理活性或功能特性的肽類。絕大多數蛋白質都是具有一定功能作用的生物活性肽的前體物質，其肽鏈結構中存在著具有一定生物活性的氨基酸序列片段(功能區)，在正常狀態下，其功能區肽段隱藏在肽鏈中，但一旦單獨從蛋白質肽鏈中釋放出來，在適當的環境下，就能顯示出獨特的生物活性，這個功能肽段就是生物活性肽。現代生物代謝研究發現：人類攝取的蛋白質經過消化道的多種酶水解后，更多的是以低肽的形式直接吸收，具有更高的營養價值和生物效價。酶水解法獲得生物活性肽已經成為工業化生產生物活性肽的主要手段。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種富含易于被人體吸收的多肽的多藻蛋白酶解制備多肽的方法。

本發明通過生物工程在體外酶解后，使藻類蛋白成為生物活性肽而直接被吸收。

一種多藻蛋白酶解制備多肽的方法，包括以下步驟：

1)預處理：將小球藻進行提油處理；

2)均質：向步驟1)處理后的小球藻中加入螺旋藻和裸藻，加入干重5-8倍重量的水，于10-25℃、50-250MPa條件下破碎均質，得到均質液；

3)酶解：向步驟2)處理后的均質液中，以100-300IU/mL的濃度加入菠蘿蛋白酶和胃蛋白酶組成的混合酶液，于30-40℃，pH＝3-6條件下酶解，得到酶解液；

4)滅酶：將酶解液升溫至65-75℃滅酶，冷卻至室溫后將酶解液離心，取上清液；

5)超濾：經超濾離心管過濾截留分子量為5kDa以下的多肽分子；

6)干燥：對多肽分子進行真空冷凍干燥。

進一步地，步驟1中，向小球藻加入1,2-二甲氧基乙烷和水，破碎均質，靜置，棄去上層有機相。

進一步地，小球藻、1,2-二甲氧基乙烷和水的質量比為1:(2-3):(2-3)。