[發明專利]泡沫分離法濃縮人尿中尿激酶的方法有效
| 申請號: | 201810371575.2 | 申請日: | 2018-04-24 |
| 公開(公告)號: | CN108265043B | 公開(公告)日: | 2020-04-21 |
| 發明(設計)人: | 李瑞;關晶;葛順;朱友雙 | 申請(專利權)人: | 濟寧醫學院 |
| 主分類號: | C12N9/72 | 分類號: | C12N9/72 |
| 代理公司: | 漢中市銘源專利代理事務所(普通合伙) 61235 | 代理人: | 周沛臣 |
| 地址: | 272067 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 泡沫 分離法 濃縮 人尿中 尿激酶 方法 | ||
1.泡沫分離法濃縮人尿中尿激酶的方法,其特征在于,包括以下步驟:
尿液的預處理:
向收集到的尿液中加入尿激酶活性穩定劑,加入質量為尿液質量的0.2~0.5%,然后調節尿液pH至8.7;
兩級泡沫分離工藝:
第一級泡沫分離工藝:對預處理尿液進行泡沫分離,用泡沫分離塔間歇分離,溫度為20.0~30.0 ℃,表觀氣速為1.7~3.4 mm/s,液層高度為1.0~1.6 m,泡沫層高度為0.6~1.2 m,對流出塔頂的泡沫進行收集并消泡,待泡沫不能從塔頂流出時,即可停止鼓氣;從塔頂流出的泡沫經過消泡后得到第一級消泡液,其尿激酶活性濃度為50.0~80.0 IU/mL,該消泡液直接作為第二級泡沫分離的進料;
第二級泡沫分離工藝:將第一級分離得到的消泡液進行泡沫分離,用泡沫分離塔間歇分離,溫度為35.0~45.0 ℃,表觀氣速為0.8~2.6 mm/s,液層高度為0.8~1.2 m,泡沫層高度為0.8~1.4 m,對流出塔頂的泡沫進行收集并消泡,待泡沫不能從塔頂流出時,即可停止鼓氣;從塔頂流出的泡沫經過消泡方法后得到第二級消泡液,其尿激酶活性濃度為500.0~700.0 IU/mL,該消泡液作為親和層析法純化尿激酶的原料;泡沫分離塔內所剩殘液的尿激酶活性濃度為15.0~35.0 IU/mL,該殘液稀釋至與尿液的尿激酶活性濃度相同,與預處理尿液混合均勻后,作為第一級泡沫分離的進料液;
在尿液的預處理之前還包含對尿液檢測的步驟,檢測尿液是否合格,合格尿液為ph5~6,尿激酶活性濃度為3.0~5.0 IU/mL;
所述尿激酶活性穩定劑是β-環糊精、α-環狀糊精、γ-環狀糊精或鉬酸鈉。
2.如權利要求1所述的泡沫分離法濃縮人尿中尿激酶的方法,其特征在于,所述消泡方法為機械消泡法。
3.如權利要求1所述的泡沫分離法濃縮人尿中尿激酶的方法,其特征在于,所述兩級泡沫分離工藝是采用如下兩級泡沫分離裝置來實現的:兩級泡沫分離裝置包含空氣泵(1),空氣泵連接著轉子流量計(2),轉子流量計連接著止水夾(3),管道通過止水夾后通向兩個泡沫分離塔,兩個泡沫分離塔分別為泡沫分離塔(5)以及二級泡沫分離塔(13),所述的泡沫分離塔( 5 ) 上方包含多個上方部分開口(9),所述的多個上方部分開口(9)通過導向管連接到二級泡沫分離塔(13);所述的兩個泡沫分離塔上方分別連接著泡沫收集器(6)。
4.如權利要求3所述的泡沫分離法濃縮人尿中尿激酶的方法,其特征在于,在泡沫分離塔(5)中上方的多個上方部分開口(9)能夠將泡沫通過導向管導向到二級泡沫分離塔(13)中,能提高泡沫分離的效率。
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